英国研究人员就获得小鼠单倍体胚胎干细胞的新方法提交专利申请

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# E: n, t/ H" r, W$ p4 b) k( v" x英国研究人员就获得小鼠单倍体胚胎干细胞的新方法提交专利申请& _! y- J3 C  @; Q: R6 [' |

% M5 i. o2 _$ `naturalkillerce导语：第一次看到这种期刊文献时，我就进行新闻编译并发表了一下个人意见，不过在当时就猜想研究人员肯定已经把这种分离方法提交专利申请，几天后，在网上搜索了一下，发现果真如此，没办法，做过专利工程师同时也做过生物技术研发的我，还是蛮有专业直觉的。在此，我把相关专利新闻编译汇总如下，供大家探讨：
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, y8 V, j  Z, P英国剑桥大学科研人员已经把第一次开发的这种获得小鼠单倍体胚胎干细胞的新方法提交专利申请，申请号为PC925858GB，以便商业化时有专利上的保护，当然前提是专利得到授权，不过个人觉得专利授权的可能性还是比较大的。# @7 E  O# z6 \4 F0 w
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专利申请背景：
* ^2 O; U0 C% L1 ~$ ]6 k4 [专利要解决的问题：复杂有机体的二倍体基因组严重制约着在模式物种上采用很多遗传方法来开展研究。尽管有人描述过在鱼上进行实验性诱导产生单倍体，然而在哺乳动物中，单倍性似乎与发育更不容易相容。该发明开发了一种新的方法来获得小鼠单倍体胚胎干细胞，解决了这种问题。6 c7 x2 k& Z* p. L

$ r9 Q1 L/ t% H$ Z! [: o专利技术内容：
  ~4 N' h" f" G, h) }/ A) c( c3 H为了获得小鼠单倍体胚胎干细胞，研究人员采取的方法过程如下所示：
! S- S# h' V" w1 Z激活未受精卵→培养到胚泡期(blastocyst stage)→移除透明带(zona)和滋养外胚层(trophectoderm)，分离出内细胞团→内细胞团在培养基(2i培养基或 含有KSR的DMEM培养基)以及LIF中扩增从而获得胚胎干细胞系→流式分析计算单倍体DNA含量并通过流式分类富集单倍体胚胎干细胞系→单倍体胚胎干细胞系经过35次以上的传代扩增。 3 a6 e' X" u: |/ U- D
  
$ k* P# h- ]) F+ y2 K5 x' M8 r最终，研究人员在7次独立实验中，从不同小鼠品种中获得25种单倍体胚胎干细胞系，这其中还包括转基因细胞系。研究人员发现这些单倍体胚胎干细胞表现出一个典型的小鼠胚胎干细胞群体形态 ，而且染色体分散(chromosome spread)分析证实它们含有20条染色体，刚好是小鼠单倍体细胞中的染色体套数。比较性基因组杂交( comparative genomic hybridization, CGH)实验也证实这些单倍体胚胎干细胞系当中，单倍体基因组完整无缺，没有片段增加或丢失。这些单倍体胚胎干细胞能够表达相关的多能性标记，它们的全基因组表达分析表明这些单倍体胚胎干细胞与小鼠常规的二倍体胚胎干细胞之间存在较高的相关性。
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' m7 N  t$ O9 _% H研究人员利用转座子piggybac进行GFP标记实验，证实在转染之后，这些单倍体胚胎干细胞的单倍体基因组含量能得到维持，即保持不变。这些GFP标记的单倍体胚胎干细胞注入胚泡，充分促进嵌合性胚胎产生，这就表明当进行二倍体化之后，它们促进发育，从而产生有活性的雌性嵌合性胚胎。这些事实表明单倍体胚胎干细胞具有发育为整个个体的潜力。
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; q8 n/ k) n2 W4 F9 u专利的潜在应用价值：
; T, D5 X/ ^, j  R% r用于前向遗传筛选时的基因鉴定；. r; p% n3 `" o. V) ]
利用单倍体胚胎干细胞产生纯合子突变文库；" j$ x- J# x+ C, S/ o; p! n9 q
在小鼠基因组特定位点引入突变。
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7 E4 Y/ F3 W' M- T7 x* {更多相关信息参见下面的帖子：( P. M/ M" D# v# \$ L
http://www.stemcell8.cn/thread-45952-1-1.html(研究人员构建出小鼠单倍体胚胎干细胞)2 T% o: j/ f. q3 V  E; e
http://www.stemcell8.cn/thread-46063-1-1.html(英国培育出单倍体胚胎干细胞)