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楼主: dragon513
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有人养小鼠骨髓间充质干细胞并传过很多代的吗?   [复制链接]

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21楼
发表于 2011-10-10 12:18 |只看该作者
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回复 dragon513 的帖子, o! m1 q: |! |% p1 Q. q0 {+ f
( |* V* l& V+ i
与你们的情况类似

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22楼
发表于 2011-11-6 22:56 |只看该作者
之前一直做大鼠的长的还行,八九代还能用。现在刚开始做小鼠的,刚传了一次,觉得还可以,后边看看情况如何。如果有类似问题再和楼主请教。
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23楼
发表于 2011-11-8 20:14 |只看该作者
楼主  请问现在情况怎么样了  我的方法和你是一样的  原代细胞数量状态都挺不错的  但是一传代就不行了
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24楼
发表于 2011-11-15 21:49 |只看该作者
我之前用的GIBCODMEM的低糖,培养的不是很好,现在用DMEM/F12+15%的FBS(GIBCO)挺好的
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25楼
发表于 2011-11-15 23:37 |只看该作者
我用了多种培养基试过,很难传过4代。当然添加细胞因子除外。
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26楼
发表于 2011-11-18 16:19 |只看该作者
我用的是DF12 10%gibcle 很慢地长 有问题 但不知道是在哪里 郁闷ing
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27楼
发表于 2011-11-18 16:20 |只看该作者
我用的是DF12 10%gibcle 很慢地长 有问题 但不知道是在哪里 郁闷ing

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28楼
发表于 2012-2-8 10:58 |只看该作者
不知现在楼主的细胞如何了?我也是用全骨髓法培养的,有几点疑惑同大家探讨探讨:1、4℃预冷的溶液必要性大吗?感觉十几度的室温对细胞并无影响;2、细胞筛网我建议不用,因为我尝试的几次用筛网对干细胞损耗非常大。3、“完全培养基悬浮并接种后,静置15 min使更易贴壁的巨噬细胞、上皮细胞等贴壁,吸取未贴壁细胞悬液再次接种”,请问这个步骤有文献支持吗?我也遇到了巨噬细胞混杂的干扰,谢谢!4、另请问做过小鼠BMSCs梯度离心分离的朋友,请问选用的细胞分离液的密度选用的是1.077还是1.073的还是1.082的呢?
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29楼
发表于 2012-2-9 01:43 |只看该作者
回复 asejon 的帖子  h/ E9 w" L0 j$ H

5 Y* d" \# p% Z6 e/ ^# N9 Z' b8 Q这个讨论很好 建议你重新发个贴子
6 z7 z; A0 r6 G/ b& j9 @. W/ f- C
# X" b' z$ z0 `回复贴不太能吸引大家的注意力

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30楼
发表于 2012-2-20 21:12 |只看该作者
楼主现在养的怎么样了?还在养么。我目前也在养小鼠的MSC 方法类似,我也比较奇怪前期步骤中的 静置15min的那个步骤,能否说明一下,谢谢
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