MSC 冻存问题

hwlightning

10%的DMSO、40%胎牛血清、50%培养基（我是用的低糖DMEM）
, \' E4 @1 t) h7 o! f& x. H4摄氏度放40分钟、零下20度放30分钟、再放零下80度、放24H就可以放液氮罐保存了
, x5 z1 T: l' e' l- ^7 y( ^一般就放-80度保存
# P8 R! B: J" S$ I: g: c如果有程序降温盒就省事了，直接零下806 r8 i' ]1 ?8 ^; |, C: e' ~
复苏效果很好
* ]2 b# V2 S# B! M. h冻存的细胞融合度80%左右吧！
1 O& [# v' h. v5 e9 }如果冻存细胞多要先把冻存液配好放四度冰箱，因为DMSO放热，刚加进去和容易损伤细胞，常温DMSO对细胞毒性也大。
( z7 f2 H0 g5 O6 r, N7 j复苏细胞我用的42度水浴，速度要快，不能有冰晶。
( }' ~+ b. d* a取细胞加入准备好的20ml培养基中，离心。重悬，培养
. a* {& b/ B; e) @1 ^希望能对你有帮助

hwlightning

用完全培养基就是1:3:6

hwlightning

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4 p; ^* [; I2 s( ^0 a
要慢冻速溶

hwlightning

回复 湖南干细胞 的帖子* x  }& W& r4 Q+ H

2 k2 g2 V. B! W) M; b我复苏细胞一直用的是42℃，复苏的细胞情况都非常好。
0 B# b* j0 ?; f- p  i: U