MSC 冻存问题

hwlightning

10%的DMSO、40%胎牛血清、50%培养基（我是用的低糖DMEM）
6 \  M; P: Z! h& I/ k% \' F8 e4摄氏度放40分钟、零下20度放30分钟、再放零下80度、放24H就可以放液氮罐保存了! B, x3 B/ [  s! {7 |2 L
一般就放-80度保存
8 x/ Q$ s" H- }6 I如果有程序降温盒就省事了，直接零下802 V) ]; }0 j- _1 Z2 Y
复苏效果很好
9 e( _! M) U3 \$ f; u: W& g- ^冻存的细胞融合度80%左右吧！
7 q3 ~; d- _# W( Q6 L( z* Z0 b如果冻存细胞多要先把冻存液配好放四度冰箱，因为DMSO放热，刚加进去和容易损伤细胞，常温DMSO对细胞毒性也大。
1 k) B# U" W# ]9 u7 G复苏细胞我用的42度水浴，速度要快，不能有冰晶。" e( F1 w8 G+ V1 h# e) v
取细胞加入准备好的20ml培养基中，离心。重悬，培养
# H0 r. R# C- h希望能对你有帮助

hwlightning

用完全培养基就是1:3:6

hwlightning

回复 andylee824 的帖子3 V) X8 F+ @. n8 v( o
7 D1 P, e; z7 M2 J$ Q9 W
要慢冻速溶

hwlightning

回复 湖南干细胞 的帖子9 _( p( l/ E1 m4 Q; M1 a
) T5 d) Y$ Z! s9 d4 U3 Z
我复苏细胞一直用的是42℃，复苏的细胞情况都非常好。
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