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慢病毒包装 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-9-21 14:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
在包装慢病毒时,一般的protocol上都是用293T细胞做转染,如果没有293T细胞,有293FT,那么用293FT转染行不?据说是293FT转染效率比293T还高啊
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沙发
发表于 2011-9-22 23:03 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子7 u3 H7 ~  d- L2 L9 ]
& F# N# J5 B9 S7 M) i' w% |5 y: M
可以,这个是公司专门开发的生产慢病毒的包装细胞
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藤椅
发表于 2011-9-23 09:55 |只看该作者
可以的。有这样包装慢病毒成功的时间
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板凳
发表于 2011-9-26 10:26 |只看该作者
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我是一个初学者,我想问一下,慢病毒包装的一般的细胞密度是达到多少?
6 Z# _+ \$ P* m+ T
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报纸
发表于 2011-9-26 11:14 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子9 P. V% X9 A6 N% f

  |, ~9 Q: }& H* u8 f& a# W/ Z+ ~293FT可以用来包装慢病毒,很多protocol都用这种细胞,不过较之293T,FT细胞贴壁性差,轻晃即可漂离培养盘,操作需小心,顺利的话得到的病毒滴度确实很高。
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地板
发表于 2011-9-26 13:28 |只看该作者
回复 majing217 的帖子
: g& ]7 J; a! m0 T0 J: L+ C; P3 a$ W( A* G4 P
一般情况下,接种的时候细胞最好是百分之7,80汇合度,到转染的时候应该是百分之90左右
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发表于 2011-9-26 13:29 |只看该作者
回复 xiaoyurly 的帖子
' O* L5 K* l' @1 M9 {  }4 V1 f- V7 y; b, Q) F0 T
293T贴壁就很差,我之前换液的时候想用PBS洗一下,结果轻轻一摇就全脱落了,而且消化直接加了胰酶然后一摇就全脱了
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发表于 2011-9-27 11:41 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子
3 E  [' g9 c% u; _
, k# v0 n' g) o0 o9 {293T贴壁性还好,操作上注意轻拿轻放,减少液体冲击。在培养过程中一般2天即传代,期间无需换液,胰酶轻微消化就能分离。包病毒后293T极易脱离盘底,因此在收病毒过程不用PBS等冲洗,收完轻轻加入新培养基即可,一般收48、72h两次。
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