关于人骨髓间充质干细胞培养方法

sunjianhua2000

最近想做人骨髓间充质干细胞，上网查文献之后发现有很多方法。我目前想用密度梯度离心法分离BMSC，具体分离液是FYCOLL和PERCOLL，想请有经验的战友推荐下哪个分离液好，并烦请写一下具体的操作程序。谢谢！！！

人在日本

用什么梯度分离啊，直接打到七号钟头里过一遍就行了，又快又省事

wangweilie0418

观察骨髓血有无凝血% i. {# H: J5 @" t% \
↓% D8 ]6 ^8 y% m  o
PBS补加至毎管45ml（毎管血量尽量均匀），1800转∕分钟，10分钟。
. I# D1 X! k' v. E: `* p↓
0 B0 X* {* |1 l; m, y3 ^  k弃上清，将沉淀用PBS重悬，毎管补加PBS后共30ml。. H4 V" w* E" t4 K
取已分装好的Ficoll（15ml∕管）将上述重悬液缓缓加于Ficoll上
! w# f6 \. c" r9 Q; V3 }4 H2500转∕分钟，20分钟
( E9 v/ Y6 M- T8 R↓% Z) v7 m) `# y; Q. F. y
吸取白膜层，补加PBS至45ml，1500转∕分钟，8分钟。
6 y* ]* J5 x* B3 m" O; m/ @↓- `' ^& @4 D& ~. j8 s
取沉淀，加PBS至45ml，1200转∕分钟，3分钟。. N) H$ |* d7 Z6 u* z! i
↓
& m) _  L# z+ i: b2 D# y: b7 `重悬，培养。
. l8 t# m$ z/ F

sunjianhua2000

pbs与骨髓稀释比例是多少，骨髓稀释液与FICOLL的比例是多少？

琛儿326

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: ]* C+ E8 i% }1 S6 D; Q; Y
8 ?6 F* M5 j) ?  Z8 G我们实验室用以下比例
  K/ Z; x) {( K3 T5 o. B8 _: ^pbs：骨髓液=1:3，
$ d) H8 r6 {; V9 _% [骨髓稀释液：FICOLL=2:14 v! s, q* S- q1 E# U0 T  @

wangweilie0418

pbs：骨髓液=1:2        骨髓稀释液：FICOLL=3:1
: J7 W* j/ a  ~2 x7 L$ u

wangweilie0418

不好意思，骨髓稀释液：FICOLL=2:18 J! }! P, N3 p. y  l

wcforever126

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- t0 J: \4 W7 V" r6 {  s
2 \4 z& i. C7 D3 }1 W+ Y1 g6 v请问您用的FICOLL多少密度的
' j3 Y! g/ F3 ?8 N7 R; L4 P. U, R