关于人骨髓间充质干细胞培养方法

sunjianhua2000

最近想做人骨髓间充质干细胞，上网查文献之后发现有很多方法。我目前想用密度梯度离心法分离BMSC，具体分离液是FYCOLL和PERCOLL，想请有经验的战友推荐下哪个分离液好，并烦请写一下具体的操作程序。谢谢！！！

人在日本

用什么梯度分离啊，直接打到七号钟头里过一遍就行了，又快又省事

wangweilie0418

观察骨髓血有无凝血6 a4 Q4 A4 n' y# M9 P2 Y6 x
↓. s9 l- c( K4 R5 i7 {3 ~
PBS补加至毎管45ml（毎管血量尽量均匀），1800转∕分钟，10分钟。
2 Y: j* B: H6 ^' k* w! G' y7 V↓
8 i: z0 ]; M- v弃上清，将沉淀用PBS重悬，毎管补加PBS后共30ml。
3 J5 z- M2 v# ~) Z. W3 V6 t5 P取已分装好的Ficoll（15ml∕管）将上述重悬液缓缓加于Ficoll上
$ a4 l6 [# e: \, b! l& V2500转∕分钟，20分钟, g; J$ R0 j  F- [
↓
/ ]# k* y4 q- d7 [" p) V* T7 `+ j  H  D吸取白膜层，补加PBS至45ml，1500转∕分钟，8分钟。
' b& R' Q" j2 N/ |6 O↓" u" t$ A+ \: a$ o# N9 _" Q
取沉淀，加PBS至45ml，1200转∕分钟，3分钟。
! B; l. v0 h/ d; x, ?  Z. h# z↓$ p- k' H5 T+ n) p4 [
重悬，培养。9 \" _7 h- w! X4 ?. |( J: Y

sunjianhua2000

pbs与骨髓稀释比例是多少，骨髓稀释液与FICOLL的比例是多少？

琛儿326

回复 sunjianhua2000 的帖子+ ?* V) y. E* Y% U0 N' R% M' c8 _
# }' g0 W3 O) k! @) i; _; |: g( O
我们实验室用以下比例+ y( G1 d' g3 r: D
pbs：骨髓液=1:3，
- t) O, \; |: S& d, Y/ o! @骨髓稀释液：FICOLL=2:10 E( J& U1 d0 y- `' C8 b

wangweilie0418

pbs：骨髓液=1:2        骨髓稀释液：FICOLL=3:1" @! j7 L: Y7 t+ M8 E& j0 p

wangweilie0418

不好意思，骨髓稀释液：FICOLL=2:1
5 [, r. K. t% P  W* i

wcforever126

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2 r: s4 V3 G- X0 T! d; Q, F3 I. z- c4 D" O
请问您用的FICOLL多少密度的
" _3 f/ d+ W/ T5 V( V9 s5 W  R