关于人骨髓间充质干细胞培养方法

sunjianhua2000

最近想做人骨髓间充质干细胞，上网查文献之后发现有很多方法。我目前想用密度梯度离心法分离BMSC，具体分离液是FYCOLL和PERCOLL，想请有经验的战友推荐下哪个分离液好，并烦请写一下具体的操作程序。谢谢！！！

人在日本

用什么梯度分离啊，直接打到七号钟头里过一遍就行了，又快又省事

wangweilie0418

观察骨髓血有无凝血
9 P- W4 V4 W$ _* \6 u7 _* A↓
' e, |( E8 }: [5 V: Q$ }2 F  mPBS补加至毎管45ml（毎管血量尽量均匀），1800转∕分钟，10分钟。
% W9 ^1 M/ @$ o5 ~# c2 q↓' B" \9 ^0 ^# u4 D: q/ z9 I
弃上清，将沉淀用PBS重悬，毎管补加PBS后共30ml。% q* ~' K( S3 p
取已分装好的Ficoll（15ml∕管）将上述重悬液缓缓加于Ficoll上
' I6 \7 G/ z2 E+ O! [$ Z2500转∕分钟，20分钟
7 I- w* q8 `% n5 I2 N) D! g- b; T↓
) c4 Z7 B4 s8 F3 W' _吸取白膜层，补加PBS至45ml，1500转∕分钟，8分钟。9 f5 l  Y5 ?6 f% ]
↓3 n6 y( p2 n7 J/ l# @2 F; f. ?
取沉淀，加PBS至45ml，1200转∕分钟，3分钟。
* F  \) [* S; U% N* N$ a& k7 i8 o↓# E  `; Y1 h& `! \; a
重悬，培养。2 y+ N1 ^' L9 T  T' ?

sunjianhua2000

pbs与骨髓稀释比例是多少，骨髓稀释液与FICOLL的比例是多少？

琛儿326

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# s, p7 I9 h) [9 U  ~- \3 {9 F& t! Q4 D' j, q
我们实验室用以下比例& D4 X! S4 b2 i- r& p, R+ d
pbs：骨髓液=1:3，/ D! a4 }; S% w
骨髓稀释液：FICOLL=2:1
  d- t8 b. K( j( J  j

wangweilie0418

pbs：骨髓液=1:2        骨髓稀释液：FICOLL=3:1# {, y# n/ u0 l+ W

wangweilie0418

不好意思，骨髓稀释液：FICOLL=2:1; l& ^" t' k! ?, K, x

wcforever126

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" M4 U0 S, N6 U/ l% @0 ~* k5 Z0 V: K
+ [; H" y' f& P请问您用的FICOLL多少密度的
+ O: T1 j: U! N9 a. U% k: n