关于人骨髓间充质干细胞培养方法

sunjianhua2000

最近想做人骨髓间充质干细胞，上网查文献之后发现有很多方法。我目前想用密度梯度离心法分离BMSC，具体分离液是FYCOLL和PERCOLL，想请有经验的战友推荐下哪个分离液好，并烦请写一下具体的操作程序。谢谢！！！

人在日本

用什么梯度分离啊，直接打到七号钟头里过一遍就行了，又快又省事

wangweilie0418

观察骨髓血有无凝血) g7 J: _% d& z* r3 B3 U2 a# c8 L8 t
↓
% z+ j' P* {1 {( JPBS补加至毎管45ml（毎管血量尽量均匀），1800转∕分钟，10分钟。( s( L0 F. B+ |5 H
↓8 z' R# i% {, r& \- _* T- z& ?
弃上清，将沉淀用PBS重悬，毎管补加PBS后共30ml。& O: z, ]0 U( p0 T+ b
取已分装好的Ficoll（15ml∕管）将上述重悬液缓缓加于Ficoll上7 ]+ Y$ ], ~% D: x
2500转∕分钟，20分钟
: Y6 G2 v& |+ o* B1 `0 t( S↓8 d( m3 H* O/ B
吸取白膜层，补加PBS至45ml，1500转∕分钟，8分钟。7 w+ X7 [/ c9 ]
↓$ u1 W' ^. q7 y. A
取沉淀，加PBS至45ml，1200转∕分钟，3分钟。& |6 N: a5 q, E' c
↓
. S; F$ ]) [+ F* R7 C4 R重悬，培养。. F( l& V3 }- d$ n3 }0 x

sunjianhua2000

pbs与骨髓稀释比例是多少，骨髓稀释液与FICOLL的比例是多少？

琛儿326

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7 H' i* [8 ^; v/ R5 \' C; p
3 h* `" h* }; y+ h4 Z7 b- ]; F我们实验室用以下比例
1 |5 w' }- Y3 c- t3 Y7 D( npbs：骨髓液=1:3，( d4 I. o2 q  x% t
骨髓稀释液：FICOLL=2:1$ X. W7 l: L& N9 S

wangweilie0418

pbs：骨髓液=1:2        骨髓稀释液：FICOLL=3:1+ y! x0 `, x2 y$ u5 ?

wangweilie0418

不好意思，骨髓稀释液：FICOLL=2:1
' U! t) j/ U# z) j

wcforever126

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( ]) J* E. L3 E
% a$ p3 J" _5 H" i/ J: x$ n6 h请问您用的FICOLL多少密度的
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