求助：如何使悬浮培养的EB贴壁？

yuyan

我们把想让获得的小鼠EB贴壁分化培养，
( n8 M2 O1 b4 V; q按照文献中的信息，用0.1%的明胶处理过细胞培养皿之后，将EB放入此培养皿中过夜培养。/ u3 s6 E9 a$ ^) W8 u! J
第二天观察，贴壁很少，10%左右。另EB消化成单细胞之后，贴壁的效率也很低，还是有很多悬浮的细胞。# L# ]* V  b- ~. P, j

0 E- p/ m  t5 {/ T- g9 U' L  V9 u请问各位，1 [+ j( o$ E; V
有什么方法可以使EB贴壁效率高一些？
1 @* n% i  G6 ?7 B; f谢谢！

梦想lab

为什么要使EB贴壁呢？

splinkerette

我们的没有问题，EB挺好贴壁的。虽然用的是0.2%的gelatin，但感觉这个应该影响不大的

梦想lab

对了，你的EB指的什么？拟胚体么？

yuyan

回复 梦想lab 的帖子
, y9 M3 S/ @' R) B' h8 \( t1 J% d8 o, [, {# f
是的，拟胚体。是想让EB贴壁后，再加诱导液分化。

yuyan

回复 splinkerette 的帖子1 ?+ l& U/ `# K

& B( h4 y9 R% z. `% D5 g  D我也试了0.5%的明胶，还是不行。
# g, T; I% q% d* h' M4 e也许因为EB状态不好，会影响贴壁效果。

牙牙丫丫123

用0.1%的明胶铺基质，然后培养液换成KO的，你试一下
: h7 m+ G' E" k2 }  M1 Q+ C" L7 W

yuyan

回复 牙牙丫丫123 的帖子
# `3 G. p% L+ `$ F& Y/ R& |/ w8 K" F
9 c: H, k, U$ j0 \谢谢啦，我试试看！

zpzp0312

看了楼上的回复，感觉这不是培养基质的问题* G5 u! s  j1 o% t: B% [1 H' G
应该是EB自身的问题2 b2 T+ x9 `/ r+ J- j5 }
楼主的EB是不是结构松散，表面不光滑，有死细胞附着？如果是这样就要优化EB制备方法了1 B( k' u  v. ]! u
建议发个EB的图片

fespysok

如果拟胚体经悬滴悬浮的时间过长，内部已经出现空腔，那样也就不容易贴壁了。