求解：DMEM/F12迅速变黄？

BRNTOTO

按照说明书配制的DMEM/F12培养基，加入血清，双抗后，用4MNaoH调节PH成7.2~7.4，在培养进行结肠组织块时，将培养瓶放入CO2培养后，很快液体就变成黄色，无混浊，镜检组织块生长正常，为见到细菌样颗粒体，请大家指点，为什么会这么快就变黄色呢？

seall

是不是组织块里的东西影响的，只要生长正常有没有细菌污染不用太担心

BRNTOTO

之前有养过结肠上皮细胞，可是也是出现同样的情况，立即变黄，，，

褚cell

貌似这个溶液对PH影响敏感，所以也不用太担心，倒是可以试着加入一些碳酸氢钠来调PH，可以缓冲一下。

snickle

建议测一下培养基的PH值

snickle

建议测一下培养基的PH值

wang3033

1.应该加入碳酸氢钠3.7克，用2N HCl调节pH,
; ~5 b0 f' H  e9 B/ M2.你直接用4MNaoH调节PH，培养基中没有弱酸弱碱缓冲物质，如何成为缓冲液？
+ r; [- ]0 s0 j6 W1 J3.培养基无缓冲能力，当然很快变黄了

xiangchou812

看一下买的培养基包装上的说明，如果是不加hepes的粉沫则第小袋需要加3.7gNaHCO3,如果已经加过HEPES，则加的是1.2gNaHCO3。% u0 A. U0 [2 y/ T: e- S4 C# N: `

aminhair

一、污染' J) t( a' ?$ Z; D! L/ u
二、你用的pH计准吗？或者说你调节最终pH值准吗？9 o( C0 X9 Q1 v; W# z* p
三、你买的DMEM/F12 需要补充的碳酸氢钠和hepes都加了吗？
( f: Z) |9 K5 Y- x6 J( M; z四、你买的DMEM/F12 哪里的？是不是假的？上网上认证一下吧！

zhusealin

可能是培养基的缓冲体系有问题吧