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楼主: kgx1986
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图片——这是什么样子的污染类型   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

9楼
发表于 2011-10-18 11:23 |只看该作者
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我在做诱导的时候遇到过这种情况,我是用24孔板进行培养的,在培养的过程中有个别孔出现了这种情况,将之吸出,用酒精棉差擦拭污染孔,其他的也还能用,应该是真菌污染,培养箱好好清理一下,只用酒精擦拭怕是不行的。
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8楼
发表于 2011-10-18 10:46 |只看该作者
应该是真菌污染
# D4 D# g! Q$ l, `# J/ m呈现团状,肉眼看起来像是蘑菇状的* r- }1 Y7 R. O% r$ Z# t
细胞要是出现了明显污染的话就弃之吧( L( x$ w# {( Z3 F  Z, v, E* x
真菌的孢子非常难消灭
: F% Z1 c$ F% W1 F很容易复发的
2 a$ Z+ f* z, |6 h/ l最好是把所有实验用具重新灭菌,屋子也照紫外,培养箱用75酒精清洁,最好是灭菌一次。
( z; B( E7 P, \1 p3 s重新培养细胞在可疑的细胞培养中加两性霉素B或者庆大霉素
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7楼
发表于 2011-10-18 10:30 |只看该作者
无法去除干净, 如果有必要, 实在是样本稀少/重要。 可以加入两性霉素B。 不过细胞毒性较大。
( N+ c& q, h0 i( {! P* l" e3 z方法: 首先移除培养基, 尤其是菌团,反复PBS洗涤。
$ S$ I/ M9 k6 E" C: a4 s% U消化细胞, 洗涤, 去少量细胞分装都多个培养空, 加入含两性霉素的培养基。 数日后,观察没有真菌污染的继续传代
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地板
发表于 2011-10-18 10:27 |只看该作者
一般此类污染, 培养基清亮, 细胞生长状态良好, 真菌成团, 蘑菇样生长。
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报纸
发表于 2011-10-18 10:26 |只看该作者
建议彻底清洁孵箱以及相关设备

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板凳
发表于 2011-10-18 10:26 |只看该作者
是真菌污染, 和双抗无关
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藤椅
发表于 2011-10-18 10:15 |只看该作者
楼主介绍的不详细:
+ s/ G; Y) |' |" G' ^$ y1.培养液中是否加双抗?
/ @2 h3 E8 b3 r& r4 }2.培养细胞是什么?组织来源?. H0 s4 a, C' |9 ]9 h
3.绒毛状的东西是否随着培养时间而增殖?
0 g$ {+ ]+ [; n  n9 u/ |4.操作过程中是否有其他的器械操作不当?安全柜或超净工作台是否运转正常?$ a# I9 n$ A/ j3 W: ^+ V7 l9 `
建议:% A4 X8 L+ u+ i' w5 v9 ^4 u
1.回答以上问题
% @; c' q6 [2 [4 K$ r0 r" D2.开拓思路,有可能是灰尘等;多查查设备,培养物品等质量是否合格?操作本人是否正确操作?
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沙发
发表于 2011-10-18 10:15 |只看该作者
真菌,能洗掉洗掉就好了,长到细胞里就没办法了。不光孵箱,室内环境也很重要
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