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图片——这是什么样子的污染类型   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-10-18 09:56 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
        如图所示,绒毛状的东西漂浮于培养基中,未见明显孢子,培养基液体清亮,细胞生长并未见明显影响,形态也变化不大,细胞换液后几天有重复出现,之前对培养箱也做过清洗,具体做法是:用消毒液擦洗两遍,酒精喷壶喷洗擦拭,紫外灯照射过夜。请大家帮助看一下是什么样子的污染类型,如果有老师也遇到过同种情况,恳请指导一下应对处理方法,十分感谢。
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沙发
发表于 2011-10-18 10:15 |只看该作者
真菌,能洗掉洗掉就好了,长到细胞里就没办法了。不光孵箱,室内环境也很重要
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藤椅
发表于 2011-10-18 10:15 |只看该作者
楼主介绍的不详细:1 X0 f+ l' [% S2 m/ ~& T
1.培养液中是否加双抗?( d7 l: G4 a5 _& I/ N
2.培养细胞是什么?组织来源?
' B3 b* F9 c7 X" h& {3.绒毛状的东西是否随着培养时间而增殖?
+ a: p; O* H, }. p5 U4.操作过程中是否有其他的器械操作不当?安全柜或超净工作台是否运转正常?1 G4 x) Q" i2 I: }: x
建议:* E; A7 O7 s6 F- j6 Q! b
1.回答以上问题* O8 s. L1 a; {4 f, d, h
2.开拓思路,有可能是灰尘等;多查查设备,培养物品等质量是否合格?操作本人是否正确操作?
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板凳
发表于 2011-10-18 10:26 |只看该作者
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是真菌污染, 和双抗无关
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报纸
发表于 2011-10-18 10:26 |只看该作者
建议彻底清洁孵箱以及相关设备

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地板
发表于 2011-10-18 10:27 |只看该作者
一般此类污染, 培养基清亮, 细胞生长状态良好, 真菌成团, 蘑菇样生长。
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发表于 2011-10-18 10:30 |只看该作者
无法去除干净, 如果有必要, 实在是样本稀少/重要。 可以加入两性霉素B。 不过细胞毒性较大。 $ m& y: w2 ?& M  V
方法: 首先移除培养基, 尤其是菌团,反复PBS洗涤。
: |- b% M/ M3 Y) @2 Z消化细胞, 洗涤, 去少量细胞分装都多个培养空, 加入含两性霉素的培养基。 数日后,观察没有真菌污染的继续传代
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发表于 2011-10-18 10:46 |只看该作者
应该是真菌污染
  L* W" Z( \, K; y呈现团状,肉眼看起来像是蘑菇状的
$ \! K+ e5 g- ^/ ^细胞要是出现了明显污染的话就弃之吧  D. [' X8 H: W6 g
真菌的孢子非常难消灭- @7 p6 D3 \) Y0 A  |/ t
很容易复发的
  @1 \; }) E. }) l最好是把所有实验用具重新灭菌,屋子也照紫外,培养箱用75酒精清洁,最好是灭菌一次。) t% [. v( t" m4 u, S
重新培养细胞在可疑的细胞培养中加两性霉素B或者庆大霉素
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发表于 2011-10-18 11:23 |只看该作者
我在做诱导的时候遇到过这种情况,我是用24孔板进行培养的,在培养的过程中有个别孔出现了这种情况,将之吸出,用酒精棉差擦拭污染孔,其他的也还能用,应该是真菌污染,培养箱好好清理一下,只用酒精擦拭怕是不行的。
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发表于 2011-10-18 11:48 |只看该作者
应该是真菌污染,我们一般叫长蘑菇了,空气湿度大的时候污染的机率比较大,细胞如果不是太重要直接丢了就行了,不大好处理
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