干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 67147|回复: 17
go

图片——这是什么样子的污染类型   [复制链接]

Rank: 2

积分
285 
威望
285  
包包
1075  

优秀会员

楼主
发表于 2011-10-18 09:56 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
        如图所示,绒毛状的东西漂浮于培养基中,未见明显孢子,培养基液体清亮,细胞生长并未见明显影响,形态也变化不大,细胞换液后几天有重复出现,之前对培养箱也做过清洗,具体做法是:用消毒液擦洗两遍,酒精喷壶喷洗擦拭,紫外灯照射过夜。请大家帮助看一下是什么样子的污染类型,如果有老师也遇到过同种情况,恳请指导一下应对处理方法,十分感谢。
附件: 你需要登录才可以下载或查看附件。没有帐号?注册
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
131 
威望
131  
包包
413  
沙发
发表于 2011-10-18 10:15 |只看该作者
真菌,能洗掉洗掉就好了,长到细胞里就没办法了。不光孵箱,室内环境也很重要
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
1458 
威望
1458  
包包
2616  

金话筒 优秀会员 热心会员 积极份子

藤椅
发表于 2011-10-18 10:15 |只看该作者
楼主介绍的不详细:9 A" N  n- p4 p8 q9 v. @# X( [
1.培养液中是否加双抗?
& ]" v+ }4 V% @/ `; B2.培养细胞是什么?组织来源?
; G6 }* J* r" H$ z, t0 p3.绒毛状的东西是否随着培养时间而增殖?8 O& V- w4 X/ i* F/ w
4.操作过程中是否有其他的器械操作不当?安全柜或超净工作台是否运转正常?
; F( ?% L; N) Y建议:" c& z2 s  L# |/ `. q; Z
1.回答以上问题+ U4 L1 y" I1 t8 a$ X( A( }
2.开拓思路,有可能是灰尘等;多查查设备,培养物品等质量是否合格?操作本人是否正确操作?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 4

积分
1322 
威望
1322  
包包
3387  

专家 优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2011-10-18 10:26 |只看该作者
是真菌污染, 和双抗无关
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
1322 
威望
1322  
包包
3387  

专家 优秀会员 金话筒

报纸
发表于 2011-10-18 10:26 |只看该作者
建议彻底清洁孵箱以及相关设备

Rank: 4

积分
1322 
威望
1322  
包包
3387  

专家 优秀会员 金话筒

地板
发表于 2011-10-18 10:27 |只看该作者
一般此类污染, 培养基清亮, 细胞生长状态良好, 真菌成团, 蘑菇样生长。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
1322 
威望
1322  
包包
3387  

专家 优秀会员 金话筒

7楼
发表于 2011-10-18 10:30 |只看该作者
无法去除干净, 如果有必要, 实在是样本稀少/重要。 可以加入两性霉素B。 不过细胞毒性较大。 3 g$ ?5 y- s$ e+ Q
方法: 首先移除培养基, 尤其是菌团,反复PBS洗涤。
+ k0 K4 p9 e  U* `消化细胞, 洗涤, 去少量细胞分装都多个培养空, 加入含两性霉素的培养基。 数日后,观察没有真菌污染的继续传代
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1971 
威望
1971  
包包
3413  

优秀版主 专家 优秀会员 金话筒 帅哥研究员 小小研究员

8楼
发表于 2011-10-18 10:46 |只看该作者
应该是真菌污染2 Y% T1 l! s" l: h0 e: a" ~8 M1 c
呈现团状,肉眼看起来像是蘑菇状的, }6 C" q- k1 T! w3 \0 R' p
细胞要是出现了明显污染的话就弃之吧; q$ v& M. ^. m
真菌的孢子非常难消灭  R  J1 F/ E( {+ L" [; {
很容易复发的
# h! e: T9 P9 S4 Z最好是把所有实验用具重新灭菌,屋子也照紫外,培养箱用75酒精清洁,最好是灭菌一次。
  c' {6 o( f7 S7 }5 u重新培养细胞在可疑的细胞培养中加两性霉素B或者庆大霉素
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
508 
威望
508  
包包
1871  

金话筒 优秀会员

9楼
发表于 2011-10-18 11:23 |只看该作者
我在做诱导的时候遇到过这种情况,我是用24孔板进行培养的,在培养的过程中有个别孔出现了这种情况,将之吸出,用酒精棉差擦拭污染孔,其他的也还能用,应该是真菌污染,培养箱好好清理一下,只用酒精擦拭怕是不行的。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
538 
威望
538  
包包
1039  

优秀会员

10楼
发表于 2011-10-18 11:48 |只看该作者
应该是真菌污染,我们一般叫长蘑菇了,空气湿度大的时候污染的机率比较大,细胞如果不是太重要直接丢了就行了,不大好处理
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题 ›
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-11-3 17:53

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.