裸鼠致癌模型

goodboy

最近将一株结肠癌细胞腹腔注射裸鼠，到现在都已经六周了，发现一只裸鼠皮下出现实体瘤，另一支无影响。除此之外将一株骨髓瘤细胞尾静脉注射裸鼠未发现有肿瘤。不知道怎么检测肿瘤？求高手指点

menghy

首先我不是高手，只是讨论下。想问的是你是需要皮下实体瘤的话，直接就可以在裸鼠皮下接种10的7次方细胞，出现实体瘤的时间2周左右就可以在皮下见到。而腹腔注射的话出现的时间和机率就大大降低。如果要简单实体瘤是不是肿瘤直接去组织块病检就可以了呀，不知道楼主具体实验要求所以就只能这样讨论下了。

zhusealin

有些细胞本身就比较难成瘤

hughliang

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我接种过的实体瘤模型多是皮下直接接种，方便观察和测量。腹腔有些巨噬细胞，不知道是否会影响成瘤，可以参考下已发表文章的经验。再就是裸鼠周龄太大，或是饲养环境不佳，都有可能影响成瘤。: W. ^9 t, c7 _- u* _/ r
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骨髓瘤模型，我试过8226细胞尾静脉接种NOD/SCID的，可以流式检测CD38、CD138等指标，我们是每周采血1~2次监测。建议先检测下细胞系CD38、CD138的表达，有时候细胞系反复传代，表面标志有变化。

gandanxiaoyang

有关结肠癌或其它实体瘤的检测方法需要区分对待：
* d# ]* O2 E* @8 M; w6 B# x（1）皮下瘤：数量较少的细胞注射可以考虑与Matrigel混合后注射，体积控制得不要太大（50-100uL足矣），观察则通过肉眼或手触摸，如果细胞本身带有Luciferase，则可以通过活体成像观察；  H' S' P" N0 R: t- _9 @8 D6 ~
（2）如果是原位（肝，胰等），或是尾静脉、脾脏注射等转移模型，则细胞带有Luciferase可以提高实验的观察便利，选定时间后注射底物，活体成像观察即可。否则，只能根据经验，观察动物状态，处死后肉眼或病理组织学检测。

conanthird

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gandanxiaoyang 发表于 2011-11-10 14:35
; D! p  d; f* T# i+ R" }9 `有关结肠癌或其它实体瘤的检测方法需要区分对待：% t$ Z/ a& [( K! d/ e+ y# v' V* N
（1）皮下瘤：数量较少的细胞注射可以考虑与Matrigel混合 ...

' H. B1 H- t" K3 n' f7 a! l5 C6 s) q$ a8 f
细胞转染Luciferase会不会影响细胞的一些生物学功能？是否需做实验验证排除？谢谢
1 k* O+ k9 @6 |" a* {& U& o) ^- ZPs，我裸鼠皮下接种过前列腺癌细胞，5x10e5四周左右就能成瘤。瘤体有花生米或蚕豆大小。

gandanxiaoyang

luciferase一般不太影响细胞的生物学特性，如果是有怀疑可以通过预实验排除。
# n& K' I" I8 M* j2 T但建的稳定细胞系与原始细胞肯定有差异，所以，对照需选择空载体的细胞系，而非原始细胞。