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楼主: imgaga
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骨髓间充质干细胞 原代 为何不贴壁???   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-11-12 18:33 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
4周龄SD大鼠,75%酒精浸泡10分钟,无菌条件下取出股骨和胫骨,放入装有不完全培养基(含双抗)的离心管里,然后拿进超净台,去除肌肉和骨膜(没有去的很干净),用注射器抽吸完全培养基冲出骨髓,用滴管充分吹散细胞,然后种瓶,一只大鼠种3个25平方厘米的培养瓶。其中一瓶是48小时全量换液,发现没有贴壁的,72小时后给另一瓶全量换液,还是没有贴壁的,最后一瓶还没有换液,打算再等一天。
+ S  x* |" }& p: d" R细胞不贴壁,是什么原因呢?和种瓶之前没有离心,计数有关系吗?一般以多少密度种瓶比较好呀?
; `1 z8 U, y/ P1 k8 ~我用的GIBCO培养基,10%四季青血清。
3 s/ N8 C& ]" _0 `  j9 M, a希望前辈们多提宝贵意见,我急需细胞,可就是养不出来呀~愁人呀
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沙发
发表于 2011-11-14 19:54 |显示全部帖子
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% f- ]4 Z& O5 G: G& P$ S
7 a( Z  s7 ~" {5 v8 h- p5 U怎么用明胶预处理呀?明胶有百分比吗?
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