小鼠核移植，供体细胞大怎么办？

wubihappy

用小鼠做核移植，供体细胞大，13~15um，效率非常低，怎么办？
: O! H3 Q9 ?, u* z/ K/ |/ N5 Q老板说用融合法试一试，融合参数是多少？& G7 z' O% a8 X; A9 L2 i
望有经验的人指点~~~

xiaomingxu

你可能得把你的情况再说清楚些，供核细胞13-15 um，是不是成纤维细胞？你是不是采用PEIZO系统注射法？你所说的效率低是核移植后卵子存活率低还是囊胚发育率不高？: ^* F1 x; S# Y; j6 c' b: E! V
一般体积大的细胞用融合法会好些，参数你可以查阅相关文献。

wubihappy

回复 xiaomingxu 的帖子% J- B% X. H* e( a. ]
3 Y7 k) h7 |+ h; Q* f" }, ~; d% O  z
是成体成纤维细胞，piezo系统注射，核移植后卵子的成活率低，卵裂率低，囊胚率没有或者有一个。现在正在用融合法做，也很纠结，还要去核，去极体，再把细胞放到卵周隙里面，在摸索电融合的条件，能推荐一篇文献吗？非常感谢？

pigembryo

最好能把你的材料与方法在详细描述一下，比如试剂、耗材、仪器等，尤其是卵母细胞来源、胞质内注射缓冲液、做一批用多长时间、重构胚激活、培养条件等等，这样更有利于大家给你提供帮助！

xiaomingxu

小鼠体细胞核移植通常使用peizo系统胞质内细胞注射法，并且技术已比较成熟，附上一篇文献供参阅。融合法在小鼠上还真用的比较少，你可以尝试使用代数相对较低的成纤维细胞（体积相对较小），另外，peizo系统对显微注射针的要求一般比较高。