新手ips培养18天形态请教

song58

不知道你做的是人的还是鼠的iPS...
# ^9 R. U8 I8 C; h不过，兄弟，我几乎可以确定这样的所谓克隆不是iPS，无论人还是鼠的iPS都是有较为清晰的边缘，克隆里的细胞也比较致密。
- D" o2 b9 |/ S* |# G! `; Y个人感觉，克隆形态是早期判断iPS很重要的一个标准。# H) W1 U# e" J9 l9 x- U
你这个细胞团有可能是fibroblast中一些杂细胞扩增的结果，或者是诱导后产生的杂细胞（例如脂肪细胞）扩增的结果

song58

我觉得吧，要是用HFF诱导iPS的话，最好不要超过6代，我试过P7和P8的HFF，感觉病毒很难进去，诱导周期很长，靶细胞后来全长疵了。
1 Y: |0 Y" w% ^( P1 P/ V( H* A2 d* xMEF的话，我建议最好不用3代以后的。

song58

请教jefferson兄：这种细胞你们IF染的啥呀？我染过AP，这样的细胞群落（用克隆我觉得可能不严谨）绝大部分都是AP阴性，只有偶尔几个尤其是看着像脂肪细胞群的能染上AP

song58

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/ t4 I! y2 F0 j9 t0 @请教jefferson兄：这种细胞你们IF染的啥呀？我染过AP，这样的细胞群落（用克隆我觉得可能不严谨）绝大部分都是AP阴性，只有偶尔几个尤其是看着像脂肪细胞群的能染上AP

song58

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厉害！敬仰！说实话，我真是佩服你的耐心和毅力！
, h8 t( Q$ R+ e2 n: o5 T20多代，100多天呀！我很好奇：
  k, E* Y) z5 M+ w7 L1、这些克隆是转基因的吗，外源有沉默吗？
- E8 j6 w5 ^. s0 V: Y4 z; t8 k. }/ j3 T2、这些60&81弱阳性有多弱，和阴性对照比是怎么样？
- L4 M2 P* \* P# P4 A7 |3、在这20多代中，那些克隆的形态有没有明显的变化呢？增殖情况如何？会不会养着养着就散了呢？' j) H- s, g- V. U

song58

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9 D- f7 L' v5 G2 V2 [3 X. j7 Z4 B' H  Y0 t; x( `0 T9 F
谢谢jefferson分享你的经历！受教了！