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请教血清和培养基保存问题   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-11-15 11:04 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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1 解冻的胎牛血清在4度能保存多长时间4 S1 I6 J" t) O2 \+ U  K
: J" |3 K/ g1 S, b: e3 z7 a8 e2 x% C
2 买的瓶装DMEM/LG加入10%的FBS后,测PH=7.3,可是用了一周后还剩300CM,测PH=8.2,这是为什么,还能用吗?
, `& {) R; l4 ^* [1 I# O谢谢
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沙发
发表于 2011-11-15 11:09 |只看该作者
买来的血清我们一般冻起来,用之前放在四度过夜解冻,第二天分装至50ml离心管里再冻起来,现用现化,分装前一定要灭活,56度水浴半个小时即可。
& `: q% O7 H; B9 l; z  }
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藤椅
发表于 2011-11-15 12:07 |只看该作者
就向楼上所说,整瓶-20保存的FBS在4度化开后,灭活,分装,然后-20保存,用的时候-20取出FBS在4度化开,立即就用。4 [% q* p* ]) c5 _
DMEM没测过PH................
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板凳
发表于 2011-11-15 12:36 |只看该作者
1. 卖血清的公司的建议是:血清-20保存,解冻方法是室温90min,室温水浴30min,37水浴30min。然后分装4度保存,尽快用完,切忌反复冻融。
. P, U0 H$ K5 k0 r% Q2. 培养基用久了PH偏碱很正常的,反复开启次数多了。最好的方法是,配好的培养基也分装一下。我养ES的时候,培养基就分成50ml一管一管的,因为ES对PH还是比较敏感的。
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报纸
发表于 2011-11-15 12:55 |只看该作者
回复 不苦的药 的帖子6 M6 T; [. x0 r& K) g

8 N4 I: Q, l' h; z0 FGibco的血清不需要灭活
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地板
发表于 2011-11-15 13:30 |只看该作者
血清看你用于什么实验了,一般培养细胞,血清是不需要灭活的。培养基开瓶后,没用完的变碱是正常现象
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7楼
发表于 2011-11-15 13:47 |只看该作者
严重同意Yedan。

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8楼
发表于 2011-11-15 15:11 |只看该作者
1、血清买来后要分装,放入负20度,用时4度解冻即可。! v/ j" E( C8 X; x" r
2、培养液500 ml的话最好也是分装,放入4度,用时再加血清。
6 g5 `9 z; _1 W' i! ?差不多是常识
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9楼
发表于 2011-11-16 09:54 |只看该作者
回复 不苦的药 的帖子) C5 E; y' o$ D9 U9 }1 n$ e- E

, `0 X/ ]% o4 H) ^+ n- a; T  I: M解冻后的FBS最好不要放太久了,解冻后立即配就是了,另外,刚买回来的大瓶FBS最好先分装,然后负20保存,用时4°解冻就行了,配好的培养基用一段时间以后变碱性是肯定的,进了空气,变得紫红
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10楼
发表于 2011-11-16 13:58 |只看该作者
血清可以不用灭活,培养基一般现用现配吧。, r  R0 e& ^% `1 \8 \
如果你用量不是很大,DMEM/LG也分装好放着,尽量减少开启的时间,避免常温放置太久谷氨酰胺分解。$ h4 [9 ^( O6 K/ T: f
加hepes也可以,但是你要观察对你的细胞有没有影响。( @% s* I3 b! S) N, ^
还有种说法是,使用培养基前,把培养基放入二氧化碳培养箱平衡一下,但盖子要稍微松一些,不知道有没有用O(∩_∩)O哈!
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