干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 56171|回复: 15
go

请教血清和培养基保存问题   [复制链接]

Rank: 2

积分
89 
威望
89  
包包
487  
楼主
发表于 2011-11-15 11:04 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
1 解冻的胎牛血清在4度能保存多长时间+ }4 j. K% }8 e- Z1 K8 S

3 ~7 W& S1 G& _2 买的瓶装DMEM/LG加入10%的FBS后,测PH=7.3,可是用了一周后还剩300CM,测PH=8.2,这是为什么,还能用吗?: t  Y, R7 [4 w3 [
谢谢
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
65 
威望
65  
包包
91  
沙发
发表于 2011-11-15 11:09 |只看该作者
买来的血清我们一般冻起来,用之前放在四度过夜解冻,第二天分装至50ml离心管里再冻起来,现用现化,分装前一定要灭活,56度水浴半个小时即可。
+ V- e1 `. D& T9 \' @
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
1019 
威望
1019  
包包
2925  

金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2011-11-15 12:07 |只看该作者
就向楼上所说,整瓶-20保存的FBS在4度化开后,灭活,分装,然后-20保存,用的时候-20取出FBS在4度化开,立即就用。
- b8 k% g3 J& h$ {$ _# q$ hDMEM没测过PH................
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
614 
威望
614  
包包
1921  

金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2011-11-15 12:36 |只看该作者
1. 卖血清的公司的建议是:血清-20保存,解冻方法是室温90min,室温水浴30min,37水浴30min。然后分装4度保存,尽快用完,切忌反复冻融。
* o2 P" E4 t- x! `+ F2. 培养基用久了PH偏碱很正常的,反复开启次数多了。最好的方法是,配好的培养基也分装一下。我养ES的时候,培养基就分成50ml一管一管的,因为ES对PH还是比较敏感的。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
598 
威望
598  
包包
77  

金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2011-11-15 12:55 |只看该作者
回复 不苦的药 的帖子
7 e3 r8 j- R9 j2 e2 q" N: J. ~% ], ?" t4 r
Gibco的血清不需要灭活
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
740 
威望
740  
包包
1597  

金话筒 优秀会员

地板
发表于 2011-11-15 13:30 |只看该作者
血清看你用于什么实验了,一般培养细胞,血清是不需要灭活的。培养基开瓶后,没用完的变碱是正常现象
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
157 
威望
157  
包包
362  
7楼
发表于 2011-11-15 13:47 |只看该作者
严重同意Yedan。

Rank: 2

积分
110 
威望
110  
包包
651  
8楼
发表于 2011-11-15 15:11 |只看该作者
1、血清买来后要分装,放入负20度,用时4度解冻即可。4 Z. @& G/ ]1 a2 ]1 v
2、培养液500 ml的话最好也是分装,放入4度,用时再加血清。5 d5 P3 ?/ d$ Q- k' r% M! B, F% L
差不多是常识
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
2917 
威望
2917  
包包
6530  

优秀会员 金话筒

9楼
发表于 2011-11-16 09:54 |只看该作者
回复 不苦的药 的帖子- U' i3 b* u" s8 f/ w7 ^9 A0 k

4 l6 n5 a: o4 h# G解冻后的FBS最好不要放太久了,解冻后立即配就是了,另外,刚买回来的大瓶FBS最好先分装,然后负20保存,用时4°解冻就行了,配好的培养基用一段时间以后变碱性是肯定的,进了空气,变得紫红
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
208 
威望
208  
包包
844  

优秀会员

10楼
发表于 2011-11-16 13:58 |只看该作者
血清可以不用灭活,培养基一般现用现配吧。
* g7 d$ q! Z$ o- h- S如果你用量不是很大,DMEM/LG也分装好放着,尽量减少开启的时间,避免常温放置太久谷氨酰胺分解。: _$ a  |1 ~, v" L+ K, ~8 I7 a& l
加hepes也可以,但是你要观察对你的细胞有没有影响。! a& }% _1 m! R, Y6 O: _6 K
还有种说法是,使用培养基前,把培养基放入二氧化碳培养箱平衡一下,但盖子要稍微松一些,不知道有没有用O(∩_∩)O哈!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题 ›
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-10-11 15:09

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.