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请教血清和培养基保存问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-11-15 11:04 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
1 解冻的胎牛血清在4度能保存多长时间0 @/ q& E1 E2 n% N  y( {+ d

/ ?6 k6 k! A. t2 买的瓶装DMEM/LG加入10%的FBS后,测PH=7.3,可是用了一周后还剩300CM,测PH=8.2,这是为什么,还能用吗?
. d' J- h/ s  Y4 B9 A& `, G% v谢谢
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沙发
发表于 2011-11-15 11:09 |只看该作者
买来的血清我们一般冻起来,用之前放在四度过夜解冻,第二天分装至50ml离心管里再冻起来,现用现化,分装前一定要灭活,56度水浴半个小时即可。
% n# {+ ?; ~, m/ q/ w( [
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藤椅
发表于 2011-11-15 12:07 |只看该作者
就向楼上所说,整瓶-20保存的FBS在4度化开后,灭活,分装,然后-20保存,用的时候-20取出FBS在4度化开,立即就用。# Y6 u4 g7 j/ |1 n
DMEM没测过PH................
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板凳
发表于 2011-11-15 12:36 |只看该作者
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1. 卖血清的公司的建议是:血清-20保存,解冻方法是室温90min,室温水浴30min,37水浴30min。然后分装4度保存,尽快用完,切忌反复冻融。0 f1 [9 o& T$ L
2. 培养基用久了PH偏碱很正常的,反复开启次数多了。最好的方法是,配好的培养基也分装一下。我养ES的时候,培养基就分成50ml一管一管的,因为ES对PH还是比较敏感的。
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报纸
发表于 2011-11-15 12:55 |只看该作者
回复 不苦的药 的帖子% Z1 w/ Y! u2 Z9 `1 v7 C0 c

, O( x7 G, D& G9 W0 DGibco的血清不需要灭活
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地板
发表于 2011-11-15 13:30 |只看该作者
血清看你用于什么实验了,一般培养细胞,血清是不需要灭活的。培养基开瓶后,没用完的变碱是正常现象
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发表于 2011-11-15 13:47 |只看该作者
严重同意Yedan。

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发表于 2011-11-15 15:11 |只看该作者
1、血清买来后要分装,放入负20度,用时4度解冻即可。% f# g: V0 r4 N2 U4 A$ T3 [' B2 y
2、培养液500 ml的话最好也是分装,放入4度,用时再加血清。
9 I$ ?9 A' @2 W5 U差不多是常识
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发表于 2011-11-16 09:54 |只看该作者
回复 不苦的药 的帖子! k0 j- z8 \) b) R, M2 ?

' I3 f( W/ W0 }% ?" r: r' b6 D- {' }解冻后的FBS最好不要放太久了,解冻后立即配就是了,另外,刚买回来的大瓶FBS最好先分装,然后负20保存,用时4°解冻就行了,配好的培养基用一段时间以后变碱性是肯定的,进了空气,变得紫红
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发表于 2011-11-16 13:58 |只看该作者
血清可以不用灭活,培养基一般现用现配吧。& v6 k: g2 g' w1 u
如果你用量不是很大,DMEM/LG也分装好放着,尽量减少开启的时间,避免常温放置太久谷氨酰胺分解。# }7 ?0 q+ y6 e% V3 e9 u) Z5 q
加hepes也可以,但是你要观察对你的细胞有没有影响。, E8 x, |# H  x/ y* c& ]
还有种说法是,使用培养基前,把培养基放入二氧化碳培养箱平衡一下,但盖子要稍微松一些,不知道有没有用O(∩_∩)O哈!
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