成年小鼠成纤维细胞培养

超级小葵

新手。现在在做成年小鼠尾尖的成纤维细胞培养，今天是第8天，剪碎后用15%FBS的DMEM培养基培养，到第4天的时候长出来这些东西，跟文献网络上描述的成纤维细胞形态不一样，想请教高手看一下，这是什么细胞！非常感谢。

yanjie11678

应该不是细胞，成体组织块培养细胞应该不会这么快迁出。看你照的照片这些东西和组织块好像不在一个面上啊。

超级小葵

回复 yanjie11678 的帖子1 x8 S$ t% a2 h* q0 @/ _
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错了，这图是第六天照的，如果这不是细胞，那是什么呢？为什么说组织和细胞不在一个面上，组织本来剪的不是很小

jhu132llh

1.细胞形态不对，请确定焦距没问题，有点疑似对焦不在细胞层面的问题
8 M9 p3 e* e  x2.成纤维细胞将会在3天内大量游离，3天左右将会生长到汇合度50-70%，尤其是组织块周围将会及其密集。
) d' `# @! s# {+ [4 O3.组织培养在培养前期（前2天）请小心少动，过多移动组织皿将影响组织块的贴壁，组织块的贴壁情况直接影响细胞游离生长。

song58

话说怎么感觉有点点像keratinocyte ...

yanjie11678

其它组织块周围也有这样的东西吗？是不是你照相时调焦距的问题？我看组织块的边缘很模糊，怀疑这些东西不在细胞层面上。

超级小葵

jhu132llh 发表于 2011-11-16 16:59 - g, ~: E' y& H3 ^$ _+ G
1.细胞形态不对，请确定焦距没问题，有点疑似对焦不在细胞层面的问题+ \! e: s, X) u7 Q
2.成纤维细胞将会在3天内大量游离，3 ...

' V& t) \+ l+ R0 J6 L& c3 B我的培养方法应该没问题吧
7 l/ _5 w# a% S6 M, X' G小鼠尾尖，剪碎后，在培养箱放半个小时左右，让其贴壁，然后加入培养基（15%FBS+DMEM+1%双抗）
! k: [7 [3 V4 F, M我每天都拿出来观察，组织贴壁不是太牢

超级小葵

回复 yanjie11678 的帖子% V8 |( U' J! u! }) a
# X6 }, G  A2 m$ H0 S  o# J4 K6 w
难道不是因为组织块比较大的原因吗？

超级小葵

:'(生气啊

jhu132llh

回复 超级小葵 的帖子# V6 S; g! A* T  T/ [, j% l5 x7 Z

" {! I: n+ e" w2 w/ [& b, q掏老窝子技巧，个人尝试好多方法后总结出来的，你可以试试- X: |/ [- h3 w# v$ u0 y2 |3 L8 r
1.可以这样，先加一点培养基，在培养皿中晃一晃让培养液均匀铺在皿底，然后加入组织块，培养- Z9 \' s$ i; u- M: |8 ~' ]5 u
2.6-8小时后沿边缘极其缓慢加入剩余培养液
0 {8 g7 h& [- S+ v9 B& w3.2天不动它$ V- d) k7 u, [' _
4.这个是总我结了很久的较难培养的组织培养的组织培养技巧，大部分的难培养的组织培养都高效，希望对你有效