干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 25667|回复: 10
go

[请教] rna提取的问题 [复制链接]

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1354 
威望
1354  
包包
484  

优秀版主 金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

楼主
发表于 2011-11-18 13:03 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
每个物种都有18s 28s基因吗,软体动物是什么情况,为什么我提取的RNA只有一条带啊1 h- X2 H; y& g4 M' O9 g, f
求教!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
183 
威望
183  
包包
1259  

帅哥研究员 积极份子

沙发
发表于 2011-11-18 13:48 |只看该作者
什么是软体动物?应该都是又这些东西的,你用的是试剂盒还是怎么搞的?就仅仅一条带?没有拖尾之类的东西吗
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1354 
威望
1354  
包包
484  

优秀版主 金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

藤椅
发表于 2011-11-18 19:05 |只看该作者
回复 xiao6tao 的帖子2 W4 L3 n% k, l$ V# J" N" I

5 K. D% W) O0 h" V; i: \7 m我提的是菲律宾蛤仔的血细胞RNA,我不知道应该有几条亮带,但是我的只有一条亮带,应该没有拖尾,260/280= 1.96 不知道怎么回事
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1354 
威望
1354  
包包
484  

优秀版主 金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

板凳
发表于 2011-11-18 19:08 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 xiao6tao 的帖子. j, ]- {' @) y6 q1 o' \1 j9 R
+ }+ a5 B$ F& t) m6 H! l$ _3 Q/ h' T
我用trizol提的

20111118 1905.JPG (104.49 KB, 下载次数: 66)

20111118 1905.JPG

Rank: 2

积分
116 
威望
116  
包包
672  
报纸
发表于 2011-11-18 20:02 |只看该作者
菲律宾蛤仔也是动物啊,不可能只有一条带!!!0 S' ]+ b. l7 b) ?7 }
而且用trizol提的话,一般会出现三条(还有一条5S),而试剂盒可能只出现两条(因为5S太小,有些柱子的膜不能承托住,被离心掉),所以不可能出现一条的情况。& M1 k! @3 S: l$ }  `
但从你的图上看,没有明显的降解出现,只能说你提取过程中有问题啦!!!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1354 
威望
1354  
包包
484  

优秀版主 金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

地板
发表于 2011-11-18 20:04 |只看该作者
回复 星移龙一 的帖子
" e+ K# l6 @; }4 d5 I! d
/ |. J7 `) O, G& |能不能详细说说过程中可能出现什么问题导致这样,谢谢啦

Rank: 3Rank: 3

积分
304 
威望
304  
包包
683  

优秀会员

7
发表于 2011-11-18 22:28 |只看该作者
真核生物的rRNA包括28S, 18S, 5.8S和5S, 原核生物的包括23S, 16S和5S, 你的菲律宾蛤仔应该是有28S, 18S和5S的。以前做过非洲爪蟾的RNA,确实包括28S, 18S和5S rRNA。  ) B1 Y( M# A" a& G3 e3 o4 y1 [" {, [
从你的胶上看,最亮最大的那条应该是28S, 接下来有一条不清楚的带,再下面那条比较清晰的带我怀疑是18S, 只是你跑胶时间过长,有些扩散了。由于你的胶较小,所以就看不到5S的影子了。建议你跑一大胶,跑得时间短些,看看会是什么效果。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1354 
威望
1354  
包包
484  

优秀版主 金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

8
发表于 2011-11-18 22:43 |只看该作者
回复 ilovelife 的帖子
& d7 B  _9 R; {7 J% w
' m2 a: j% {, U/ K4 g% J好!

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1354 
威望
1354  
包包
484  

优秀版主 金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

9
发表于 2011-11-19 11:19 |只看该作者
回复 ilovelife 的帖子: d* ?; b0 r+ O! }8 ~
+ ]0 o; n8 F5 B5 c3 X5 t
这是今天跑得电泳 150v 20min 1%胶
8 F) v0 Z5 {8 c2 \6 E& @' E为啥还是一条啊,下面的是什么东西?4 R7 \' z/ Z4 S# o- M/ C% X$ J
求教!!谢谢

20111119 1056.JPG (29.47 KB, 下载次数: 64)

20111119 1056.JPG

Rank: 3Rank: 3

积分
304 
威望
304  
包包
683  

优秀会员

10
发表于 2011-11-21 10:24 |只看该作者
你是用什么方法提的RNA呢?我以前一直是用Trizol 提,提过小鼠,大鼠和非洲爪蟾的,跑出来的都是三条带。如果你用的是Trizol的话,你要不试试别的批次的Trizol?另外你能查到有关菲律宾蛤仔的RNA文献吗?报道出来的RNA是什么样的?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-5-4 23:53

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.