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求助:关于犬骨髓干细胞表型CD90/CD45流式鉴定? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-11-21 22:39 |显示全部帖子
回复 stefan 的帖子4 g& n- C3 @  W- p7 d, F

% E$ }" R/ B1 L抗犬的估计很难买,因为大多数都是抗人和抗鼠的,我当时买抗兔的也很难买到,建议你几个公司吧,millipore、AbD Serotec、Antigenix America、BD,这几个都不错,特别是Antigenix America的很多抗体都是别的公司没有的。
% F! u7 _6 K# g- H" `这是我做的具体步骤,你参考一下
+ |! \; r$ p: t& V3 _4 C①P5×105 cells—1×106 cells/样
. [; l9 W# ?: x- r②抗体稀释液洗涤
% x* S( E+ X5 Q/ F5 y③加入一抗,4℃避光孵育30min3 {: u2 Z, s* l1 a2 Z
④抗体稀释液洗涤9 Y* E& w+ ^! v9 E' A/ j) M
⑤加入二抗,常温避光孵育/ M8 W2 d0 p2 _9 w
⑥抗体稀释液洗涤) ?( y; y/ q" p1 w4 B6 f) e
⑦加入抗体保存液,4℃避光保存待测! J4 r* R4 E6 z2 I9 m
注:如果一抗自身带有抗体,那就不需要⑤、⑥步。
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沙发
发表于 2011-11-21 22:40 |显示全部帖子
回复 stefan 的帖子
5 [# m# }* Z! [" W, X4 a1 n! k7 g! u
买抗人和抗鼠的,与犬有杂交的也行,但是交叉结合效率就不好说了
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