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easy001

新手上路

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楼主

发表于 2011-11-23 17:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

如题，那位高手做过不用feeder cell 培养小鼠胚胎干么，求赐教

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歪歪

版主

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沙发

发表于 2011-11-23 20:17 |只看该作者

同求教

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l19rna

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藤椅

发表于 2011-11-23 22:41 |只看该作者

培养基配方：GMEM+Lif+10%FCS+L-glutamine+non-essential+pen/strep+2-mercaptoethanol# e" A4 ^2 h& ~. D% b' `) d( z
培养皿用之前需要gelatin包被

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xiaojunhu1985

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板凳

发表于 2011-11-24 09:04 |只看该作者

再加上两个小分子PD098059 CHIR99021

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haijing12585

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报纸

发表于 2011-11-24 09:14 |只看该作者

现在有成品的培养基，效果应该会比自己配制要好。

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llecstem

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地板

发表于 2011-11-24 09:31 |只看该作者

本帖最后由细胞海洋于 2011-11-24 19:22 编辑 2 R# p. x( z4 \) X. R

我们实验室是平板用gelatin处理是必须的，其他的和用feeder培养时相同。前几天PNAS上有文章说用紫外照射聚苯乙烯后，可以促进干细胞生长且不用feeder
http://www.stemcell8.cn/thread-49008-1-1.html

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ouyangjuan

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7楼

发表于 2011-11-24 11:33 |只看该作者

我们实验室采用的是Austin smith 的培养基，培养基配方：DMEM+knockout DMEM+Lif+L-glutamine+non-essential+pen/strep+2-mercaptoethanol% +PD098059 CHIR99021。培养半需要先用gelatin包被过夜。具体可以参考文献如下：http://www.nature.com/nature/jou ... bs/nature06968.html。