干细胞传代时的数量为多少合适？

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不知你做的成人干细胞的来源是哪里 我们做骨髓的话一般都是按照1:3的比例传代，传代过程中基本上第二天就有30-40%汇合度的样子，但是细胞在传代前的状态是很关键的，一般细胞处于对数期的时候状态与活力最好，就是汇合度达到80-90%的样子
4 m/ P# y5 K6 l还有 你说你的细胞形态都是很大很薄的那种 估计是你在培养的过程中细胞的性质已经发生了变化，即分化，这种细胞形态体积比较大，增殖很慢，再说你没有经过流式或其他表面MARKER的鉴定，很难下结论
5 P& p; i" e  D( ]2 R. x  J一般情况下，我们用15-cm的dish培养细胞在长满后细胞的数目可以达到3-5*106的，可能细胞的来源不同，大小会稍微有差异，但是整体上各种不同来源的间充质干细胞的差异还不是很大的

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3 y6 c0 l0 U6 l" |4 S间充质干细胞的正常培养一般是不需要加什么特殊饿生长因子的; o5 O3 ?3 l( B; x
只要加一定的FBS  一般的含量是5-10%
- |1 \; Q; D5 d9 l  \" j* c一般原代要传到3以后算是比较的纯  一般的实验研究可以用3-10代的细胞* M9 s, w0 c$ u/ c+ d
至于能穿多少代 这个不好说 我们先前的实验室传到二十多代吧 但是超过10代的都没用过

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回复 sarah19860420 的帖子
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细胞数量还算正常 不同个体来源的间充质干细胞表观形态会可能差别比较大 但是经过流式检测可能不会有什么差别的
! e. v* I& E+ E# B* p/ f) T4 J我们在实验过程中也遇到过这种情况 3 m5 N" j& k, @
我说的分化只是一种可能 再说分化到什么阶段也没办法确定的
9 a' Z+ i( c8 w8 |& t9 b  R$ w分化是个过程 呵呵 检测蛋白的表达有个范围 1 T3 P9 S1 _" T% A0 G
所以可以检测 不用担心的