关于qPCR 表达量的问题探讨

ilovelife

一直用两步法，对一步法没有经验。% j. Q5 z1 e2 T
引物倒是都用过，但是在不同时期，没有一起side by side做过对比实验，oligodT针对的是poly尾巴，你的要是高表达，用oligodT引物应该不错吧。9 }$ D/ _" x; ]
你用的是realtime PCR吗？我想你应该先做模板梯度实验摸条件，我一般是做10倍梯度稀释，共稀释至少4个梯度，我一般稀释6个梯度。有时对idNTP、引物浓度也需要摸条件，祝你好运。