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楼主: yahyo	go 请教MII期卵子染色体扩展 [复制链接]

xiaomingxu

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优秀版主金话筒

7楼

发表于 2011-12-6 09:56 |只看该作者

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不知道你所说的成功率是指什么，如果只是看到核，那基本没什么问题的，如果要得到很好的分散染色体，那就比较低，大部分是分散度不好。

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yahyo

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地板

发表于 2011-12-5 17:17 |只看该作者

论坛里面有做PGD（胚胎移植前基因诊断）的吗？个人觉得临床上的卵裂球原位杂交技术可以参考一下！

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yahyo

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报纸

发表于 2011-12-5 17:15 |只看该作者

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5 B4 J+ i- }$ z) p6 f$ m
谢谢你的回答！我试试缓和一点的固定方法，请问你有统计固定一个卵子的成功率有多少吗？

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xiaomingxu

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优秀版主金话筒

板凳

发表于 2011-12-5 08:46 |只看该作者

楼主的问题真的是一个很棘手的问题，我们也尝试过做MII期卵母细胞核型，但效果也是不理想。
但可以就一些细节问题进行切磋：我们尝试的方法是，先AT去透明带，PBS清洗，然后，醋酸钠+BSA低渗（可以尝试KCL低渗），TW-20/HCL固定（楼主用甲醇：乙酸=3:1固定确实很剧烈，会发生卵母细胞找不到的情况，所以要尽量控制加的固定剂的量），后面常规操作，遇到的情况与你基本相同，有时可以见到完整的染色体，但有时染色体散的很开，也遇到染色体凝集在一起的情况。改进中......