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楼主: yahyo
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请教MII期卵子染色体扩展 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-12-6 23:54 |显示全部帖子
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本帖最后由 hcluo 于 2011-12-6 23:55 编辑 / a" W/ N! f4 N' p- v/ t) I

; L4 ?4 R1 x, h$ w( {: g  {我也最近在做成熟卵母细胞的染色体核型,我得到和楼主差不多的结果,发现加入甲醇和冰乙酸固定液以后,确实对细胞的影响很大很剧烈。我用的低渗液是68nm的KCL, 用了三步固定液,第一步是固定液甲醇:冰乙酸:水=5:1:2,第二步固定液,甲醇:冰乙酸=3:1,第三步固定液是甲醇:冰乙酸:水=3:3:1,最后在载玻片上看到一些没有破裂的卵母细胞,还有很多不见了。所以也来求各位指导。你们也用超排来做成熟卵母细胞染色体分析吗?另外,烤片有必要吗?低渗液浓度是不是太低了啊?
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沙发
发表于 2011-12-6 23:59 |显示全部帖子
回复 xiaomingxu 的帖子
  W" L# b, L" J+ j& g5 ~& k$ o  H! D
请问你用的低渗浓度是多少的啊?时间多少?固定液的浓度是怎么样的啊?具体需要多长时间啊?你是载玻片上固定吗?需要滴片吗?你用的AT是透明质酸酶吗,浓度多大啊,处理到什么程度?
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藤椅
发表于 2011-12-13 10:11 |显示全部帖子
回复 xiaomingxu 的帖子
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谢谢,准备尝试
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