免疫组化用TMB显色可行吗？

sidalin301

最近在做免疫组化，刚开始用DAB显色，做了几次感觉用普通的显微镜很难观察，显微镜的光造成的暗黄色的背景和显示出来的浅棕色很难区分，又考虑到DAB的毒性，于是改用了TMB显色，做了两次感觉效果好很多，一个一个的蓝色颗粒看得很清楚。1 a0 v, j* \7 m% z' o, R# m+ n
问题如下：1、用TMB显色可行吗? 用来发文章会被认同吗？SCI源的文章用这种显色方法做免疫组化的多吗？8 e) H" x. x- u3 F( G
2、我做了一个阴性对照（PBS）竟然也有很多蓝色的颗粒，难道是我用PBST洗片子的时候把
& q& u# k1 U' F& @& A它们放在一起洗造成的？" S0 }# ]$ T* \3 ?& L8 M) y5 J& H3 R
请有经验的朋友指点迷津，感激不尽！
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qwmwolf

TMB和DAB都是辣根过氧化物酶的底物，只要是能结合有二抗的地方，应该都能特异显色的。至于的的对照组中也存在有染色，可能原因，应该是非特异染色，或者像你说的放到一块洗造成的假阳性结果，或者说你的TMB试剂有问题。下一步你可以尝试着排除这三个方面的因素。

sidalin301

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谢谢这位朋友的意见，那其他问题呢？