实时定量PCR相对定量的一个问题

ielisa

各位大侠好！小弟刚开始做干细胞，要做定量PCR，目的是为了检测干细胞分化为目的细胞过程中几个MARKER基因的表达情况。每次收取细胞样品时我是尽量做到收取的每一份样品尽量均一，即细胞数目，浓度什么的尽量一致，然后就抽提RNA，反转，做定量PCR了，是相对定量，最终结果分析用的是△△CT方法。现在问题来了，我只是收取细胞尽量均一，并没有测细胞数目，只是大概目测均一了；抽提RNA后也没有测RNA浓度，因为RNA很不稳定，我也不想测；做定量PCR有内参基因，并且采用的还是△△CT分析最终结果，如果样本不均一的话，即每一份收取的样品细胞数目不等，这对最终的定量结果影响很大么？是不是会影响到最终的数据走向？

ielisa

请各位大侠帮忙解答下哈！谢谢！

ielisa

RNA很容易被RNA酶降解，所以抽提到RNA后就很快的反转成CDNA了，没有测浓度。没有MEF的。4 H" r& g2 Y/ w0 A9 m
唉，其实说白了，还是嫌麻烦不想测浓度，觉得应该对结果影响不大的

ielisa

影响不大，确定吗？