关于DNase的问题

huangcong1988

DNase能除掉RNA中的质粒吗？4 o% c% ]. P# l5 k! [/ y  X
DNA酶处理RNA的时候，用量是多少？就是每1微升RNA溶液加多少DNA酶？这个有依据么？1 Q% g1 T, Z. g/ D2 O6 p
另外，能推荐一下用的比较好的DNase品牌吗？我想订一些DNase，因为之前用RNA作为模板都能扩出目的片段，怀疑是质粒污染，而做定量，质粒污染会严重影响定量结果，所以，想再反转录之前先用DNA酶把RNA溶液先处理一下，这样能除掉DNA的影响
1 e! H* t! a$ T& GPS：一般提RNA的试剂盒不是能除DNA（或者说基因组污染）吗？这不是坑爹吗？那这样我说之前定量结果都是有问题的。

song58

很多公司都有吧，Amion，Promega，R&D，Sigma，Roch

栀子花开

我们实验室用的Promega的DNase，货号貌似是M6什么的，忘记了
6 p. B8 ]! @( T9 _' s1 _7 t至于用量，那个酶的说明书里是有说的，你按照说明书来就行了。( ~: i5 d+ \3 g" h4 J: A+ e

* M  v6 B" K$ e对了，一个小建议，你用DNase处理RNA，建议你先试下，或者留一半保底，因为我们实验室曾经用DNase处理过后，做QPCR时数据特诡异.......
4 f7 g; a: N# i( r6 x$ ~祝你好运！

huangcong1988

回复 栀子花开 的帖子7 S7 U; _1 g! g/ r' e$ K; f# u) W9 L
( @! `5 H& i/ ]+ Z: k; G& C8 [  p# a
呵呵，谢谢

栀子花开

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& }4 m( ^6 l3 B  U: o- u9 T* i2 U; b$ f. U! I
没关系，呵呵~~~血清多点呢？不知道效果会不会好些

zerollx

Qiagen 的RNA提取试剂盒里面有配套的DNAase，按说明书做就行了，在反转录的时候，Qiagen 也有一款含DNAase的反转录试剂盒，两个过程中都用DNAase消化，基本没什么问题了。

sunshy2772

个人觉得天根提RNA的试剂盒挺好用的，里面有DNase；invitrogen的试剂盒没有DNase，而且也挺贵的