培养原代MSC，在消化细胞时，细胞团特别多，如果将来此消化的细胞用于临床？

xu_shufen

7 y* Z: v5 q6 q8 M, O8 G2 ]

; I' T: O4 o$ g) F) J各位同仁好，我现在培养原代MSC，在消化细胞时，细胞团特别多，如果将来此消化的细胞用于临床将面临很多问题，比如栓塞。如果过滤细胞将会损失很多细胞。希望大家帮助。

linghuchong123

没有震荡器吗，用什么酶消的，

大少爷

混匀冲洗，吹打开，再过滤，再传一代培养。

dyg108

请说明一下做的什么来源的MSC，用的什么方法，胰酶消化液的配方是什么，在什么样的温度下消化多长时间？
! g7 X5 z+ s' S( d, C" ^0 U: L' w说明了这些问题以后才好判断究竟是怎么回事，用什么解决办法

漂泊的风

估计是胰酶的浓度太高了，0.25%的吧？建议你适当地降低一下胰酶的浓度（比如0.125%），这样也许会使细胞分得比较开。

xu_shufen

谢谢！我准备试一下

xu_shufen

回复 dyg108 的帖子! _& x/ ?3 y8 w1 ]& d. r
/ q0 T* Y& V% b& c/ D5 J  s9 x4 R
我用的是INVITRIGEN的商品胰酶，室温下消化，我现在正在准备降低胰酶浓度。

tingwuyu

原代的细胞团多不代表传代后也多啊，除非你用于临床的细胞，消化时细胞团多，要过滤，要不然担心啥

beijingren

tingwuyu 发表于 2011-12-8 08:34 - W" l+ C0 B8 e- Y3 P' g
原代的细胞团多不代表传代后也多啊，除非你用于临床的细胞，消化时细胞团多，要过滤，要不然担心啥

1 n6 i- A* k: k& P  @  X
楼主的意思将来可能会用到临床啊  V5 Q) b8 ?8 W8 T: C. q+ ?
我觉得楼主想问问题又有所保留
. w7 J  p) G) A6 g/ B胰酶的浓度啊，室温多少啊，时间也没讲
1 W  q% k: A  _, `9 g1 |这个问题我觉得没有保密的意义呀2 g" o2 U0 |1 ~# I0 i$ V+ s. c
如果不愿意说，楼主可考虑尝试改变胰酶浓度和消化时间摸索消化条件，注意消化后细胞的活力哦

shashou_com

细胞团最好是别用来直接治疗。9 Y6 q& _( ^" _( L; f
你要么除去细胞团，要么重新培养。