plat-E的培养方法

zhangtang

哪位朋友知道培养plat-E细胞是用哪种培养液啊？血清浓度是多少啊？还需要添加何种成分呀？谢谢

Yedan

DMEM 10%FBS  plus Blasticidn S and Puromycin
) c( a! T% K! n3 p10mg/ml Blasticidn S for 1000X stock
( w) v1 N4 i) Q& g- v, T10mg/ml Puromycin for 10000X stock
" a% r* S8 c8 y0 }( |+ x& K
1 h  f6 Z0 @) y9 ]Before the transfection Blasticidn S and Puromycin withdraw

大刀无敌

DMEM 11995 add  10% FBS  10099-141 NEAA  P/S      
* X1 g  E( e' {+ q" H: r其实就是293 很好养的 长的很快 消化是要多吹打一下使其成单细胞  E$ ]0 k1 J3 J& p. b* Z! Z2 S+ |+ M2 v
传得代数多的话最好筛选一下再用6 d' }7 H$ R& P6 W5 Y' `
刚买回来的时候多冻点，用一只复一只，就省的筛了

chenks

直接用高糖DMEM加上10%血清就行了,血清可以用HyClone的或PAA的

wangcs

我们用高糖DMEM+10%HyClone血清+双抗，效果挺好的。但有一个问题要注意，这种细胞容易漂，所以换液时要轻柔，不能让移液器直接吹到细胞。

zhangtang

回复 wangcs 的帖子. N" S& e" M% \- @
8 S! I; u6 ?3 |
我想问一下，这种细胞消化是不是用0.1%的胰酶就行呀？

zhangtang

回复 大刀无敌 的帖子
% c% @% v3 }) \3 Q7 p
* \8 K. m- l7 U: V& x1 W. Z7 Y3 M用什么来筛选传得代数太多的plat-E细胞啊？

wangcs

最好用0.05%的胰酶，时间要短，37°C 几十秒就行。

大刀无敌

回复 zhangtang 的帖子$ Y! W4 e8 X6 v3 L0 u
- W- ~4 ?- J6 s1 Z1 E  ]8 b4 U" t
本帖二楼写了

gaofei0515

哪位同学有Plat-E细胞，能分我一点吗？