plat-E的培养方法

zhangtang

哪位朋友知道培养plat-E细胞是用哪种培养液啊？血清浓度是多少啊？还需要添加何种成分呀？谢谢

Yedan

DMEM 10%FBS  plus Blasticidn S and Puromycin* }& C' w7 [7 v" F
10mg/ml Blasticidn S for 1000X stock
9 A5 b; G- D& n" F0 k1 M, ~) |5 T10mg/ml Puromycin for 10000X stock
: r1 B7 s0 E. g2 I) `, [' x* w6 N2 r0 x4 n% }; Y. |" R5 s+ q0 v
Before the transfection Blasticidn S and Puromycin withdraw

大刀无敌

DMEM 11995 add  10% FBS  10099-141 NEAA  P/S      
/ g- \& y1 T* Z$ p' P其实就是293 很好养的 长的很快 消化是要多吹打一下使其成单细胞! a# q+ ~. F3 O4 X+ [5 `
传得代数多的话最好筛选一下再用
( N6 Y9 m7 W! e+ a. y8 C$ v刚买回来的时候多冻点，用一只复一只，就省的筛了

chenks

直接用高糖DMEM加上10%血清就行了,血清可以用HyClone的或PAA的

wangcs

我们用高糖DMEM+10%HyClone血清+双抗，效果挺好的。但有一个问题要注意，这种细胞容易漂，所以换液时要轻柔，不能让移液器直接吹到细胞。

zhangtang

回复 wangcs 的帖子
# R3 M( B0 N! @! I
3 A4 \4 ^. F$ \0 T我想问一下，这种细胞消化是不是用0.1%的胰酶就行呀？

zhangtang

回复 大刀无敌 的帖子7 _7 \+ X" {- t5 u4 [& g
6 O: E. e! U9 V0 j3 I
用什么来筛选传得代数太多的plat-E细胞啊？

wangcs

最好用0.05%的胰酶，时间要短，37°C 几十秒就行。

大刀无敌

回复 zhangtang 的帖子6 \4 t) _- e9 R1 S; z2 T  k

. i6 r% V! S6 e' @# W# v& ^本帖二楼写了

gaofei0515

哪位同学有Plat-E细胞，能分我一点吗？