成骨诱导11天后Alizarin Red staining，求鉴定

hxf_86

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这是我成骨诱导11天后的钙结节染色，大概流程如下1 z% y4 W/ H5 q' y' k4 T
PBS洗2遍，95%酒精固定10min，ddH2O洗3遍，然后0.1%Alizarin Red染色（做了个时间梯度，分别是5,15,30min），然后ddH2O洗3遍，拍照。下面是图片，求各位大侠鉴定~谢谢~3 v! V( ~5 N" }
染色30min-1
  C* d! x* e/ M$ b6 X- G染色30min-2- x: P) G# \: G7 k
染色15min
9 D- M2 Y" [# f5 G染色5min

wangzhiqi86

不清楚为什么要用双氧水处理呢？固定洗涤后，直接染色就好了啊

luoziwei

wangzhiqi86 发表于 2011-12-8 22:54
: y1 w2 j# Y& S, f) v. e3 H不清楚为什么要用双氧水处理呢？固定洗涤后，直接染色就好了啊

/ C8 M% W9 O- z) x% H
大哥，那是ddH2O，是双蒸水，不是双氧水

luoziwei

楼主是不是把茜素红染色液的pH调高了，偏碱性的染色就是不太正。不好说你的染色是不是钙结节，当然我也遇到过这种染色。从我的经验来说，如果ph控制在5以下的话，就有60%的可能性不是的。

wangzhiqi86

回复 luoziwei 的帖子
; x" C0 p7 f5 K0 m& J; Y! L% \3 N8 V+ S3 ]2 H
不好意思，看错了，我还纳闷，只有免疫组化里面才会用到双氧水啊。茜素红染色确实和染料的pH值有关

tjutiger

所用细胞是MSC么？11天就开始染色。。。

ljzmy82

MSC诱导分化吗，要是干细胞分化没有这么快的呀，得20天左右吧

细胞-77

回复 luoziwei 的帖子: ?, E9 c' a1 U3 `5 Z" M

* i+ D4 u0 [( q可否把你的茜素红试剂配制和染色步骤分享一下吗？谢谢

luoziwei

我已经在论坛里说了几次，都有详细步骤的，你可以查看看嘛

hxf_86

luoziwei 发表于 2011-12-9 10:03
/ x, u$ r* ?% u1 K7 e2 T6 S3 z楼主是不是把茜素红染色液的pH调高了，偏碱性的染色就是不太正。不好说你的染色是不是钙结节，当然我也遇到 ...

( a' N. T: [1 X5 a  z$ ^你好，谢谢你的回帖~我把PH调到8.3了。那请问你PH调到多少为合适呢？