成骨诱导11天后Alizarin Red staining，求鉴定

hxf_86

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这是我成骨诱导11天后的钙结节染色，大概流程如下  i3 c" S+ c7 C. D% j) ]  y
PBS洗2遍，95%酒精固定10min，ddH2O洗3遍，然后0.1%Alizarin Red染色（做了个时间梯度，分别是5,15,30min），然后ddH2O洗3遍，拍照。下面是图片，求各位大侠鉴定~谢谢~' M4 @) y5 Z4 h. g4 W
染色30min-1; P) F* G' d6 D- D; {" @) p% W
染色30min-2
# f, l/ }  B9 k9 h7 K; ^染色15min2 C# F- }/ y9 k
染色5min

wangzhiqi86

不清楚为什么要用双氧水处理呢？固定洗涤后，直接染色就好了啊

luoziwei

wangzhiqi86 发表于 2011-12-8 22:54 + H' B  i7 t6 R# G0 Q
不清楚为什么要用双氧水处理呢？固定洗涤后，直接染色就好了啊

0 V! Q7 ~+ W  V5 k. T' V大哥，那是ddH2O，是双蒸水，不是双氧水

luoziwei

楼主是不是把茜素红染色液的pH调高了，偏碱性的染色就是不太正。不好说你的染色是不是钙结节，当然我也遇到过这种染色。从我的经验来说，如果ph控制在5以下的话，就有60%的可能性不是的。

wangzhiqi86

回复 luoziwei 的帖子
8 N# r/ H% |% y. D4 U# C
' p6 l' c! i7 [不好意思，看错了，我还纳闷，只有免疫组化里面才会用到双氧水啊。茜素红染色确实和染料的pH值有关

tjutiger

所用细胞是MSC么？11天就开始染色。。。

ljzmy82

MSC诱导分化吗，要是干细胞分化没有这么快的呀，得20天左右吧

细胞-77

回复 luoziwei 的帖子
3 V& B6 a, A( u& M
# I: a# s; q8 @' F9 f可否把你的茜素红试剂配制和染色步骤分享一下吗？谢谢

luoziwei

我已经在论坛里说了几次，都有详细步骤的，你可以查看看嘛

hxf_86

luoziwei 发表于 2011-12-9 10:03
! _3 G) }' h5 J/ t8 [楼主是不是把茜素红染色液的pH调高了，偏碱性的染色就是不太正。不好说你的染色是不是钙结节，当然我也遇到 ...

' y5 ?7 O( _. `3 j6 S9 d+ @& ~
你好，谢谢你的回帖~我把PH调到8.3了。那请问你PH调到多少为合适呢？