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成骨诱导11天后Alizarin Red staining,求鉴定   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-12-8 22:46 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 hxf_86 于 2011-12-8 22:48 编辑
3 d1 T, Y8 e  v% A( @" |* m. ]7 s7 H- m
这是我成骨诱导11天后的钙结节染色,大概流程如下
6 q8 {0 K- f$ B: M& t3 z+ kPBS洗2遍,95%酒精固定10min,ddH2O洗3遍,然后0.1%Alizarin Red染色(做了个时间梯度,分别是5,15,30min),然后ddH2O洗3遍,拍照。下面是图片,求各位大侠鉴定~谢谢~
, J$ H' E+ a: z* v9 u染色30min-11 x, u: G* W: {8 D0 u
染色30min-2
/ x, B. F! e" i) S9 A5 S  a染色15min4 Q8 ]9 u2 `6 w& {9 N. m
染色5min
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沙发
发表于 2011-12-8 22:54 |只看该作者
不清楚为什么要用双氧水处理呢?固定洗涤后,直接染色就好了啊
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发表于 2011-12-9 10:00 |只看该作者
wangzhiqi86 发表于 2011-12-8 22:54 # o  K6 D5 R8 F5 F7 |0 }
不清楚为什么要用双氧水处理呢?固定洗涤后,直接染色就好了啊
- E: b. D% H- c/ O% v
大哥,那是ddH2O,是双蒸水,不是双氧水
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板凳
发表于 2011-12-9 10:03 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
楼主是不是把茜素红染色液的pH调高了,偏碱性的染色就是不太正。不好说你的染色是不是钙结节,当然我也遇到过这种染色。从我的经验来说,如果ph控制在5以下的话,就有60%的可能性不是的。
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报纸
发表于 2011-12-9 10:29 |只看该作者
回复 luoziwei 的帖子
  Q+ I; u. O3 a2 [' N5 m* S* \1 m3 i2 }& a
不好意思,看错了,我还纳闷,只有免疫组化里面才会用到双氧水啊。茜素红染色确实和染料的pH值有关
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地板
发表于 2011-12-9 11:10 |只看该作者
所用细胞是MSC么?11天就开始染色。。。
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发表于 2011-12-9 14:02 |只看该作者
MSC诱导分化吗,要是干细胞分化没有这么快的呀,得20天左右吧
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发表于 2011-12-9 17:25 |只看该作者
回复 luoziwei 的帖子
) d7 F' s/ r% @- U
! W( ]( I( g8 G. ]/ `8 R  q- c可否把你的茜素红试剂配制和染色步骤分享一下吗?谢谢

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发表于 2011-12-9 19:31 |只看该作者
我已经在论坛里说了几次,都有详细步骤的,你可以查看看嘛

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发表于 2011-12-14 12:55 |只看该作者
luoziwei 发表于 2011-12-9 10:03 2 C# Y/ {6 V1 A2 t! F: a: v/ y- j
楼主是不是把茜素红染色液的pH调高了,偏碱性的染色就是不太正。不好说你的染色是不是钙结节,当然我也遇到 ...
$ J" q+ A7 R# L3 d
你好,谢谢你的回帖~我把PH调到8.3了。那请问你PH调到多少为合适呢?
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