关于胎牛血清灭活的问题

lcxlorna

小牛血清或新生牛血清是要灭活，胎牛血清不需要灭活吧。胎牛尚未出生，并没有补体成分，所以不用灭活，一般瓶子上都有标记，有的已经灭活好了，直接用就行。

shuangreny

灭活的目的主要是去除补体成分，有人说可以杀灭支原体，这个似乎未得到广泛认可；大多说细胞不需要灭活，因为有人认为灭活可能对一些细胞有益，有一些反而有害（具体不详）；方法是“严格按照”56度30分钟。注意是解冻放置常温后在直接放56度温水中。有此一个同学把血清从负20冰箱拿出来直接放进调好的56度水浴锅中，大约2、3分突然反应过来，血清也容得差不多了，不过用起来也挺好的，他养的骨髓瘤的细胞。实验室也有同学为节省时间，自冰箱取出后直接放60度解冻并灭活，也没有反应不良现象。一般灭的也是小牛，胎牛不需要。总之，血清灭活多是不需要的。除非你的试验特殊，可以预试验比较下。

qiuweiqin0618

一直使用GIBCO胎牛血清，不需要灭活。

ldy689689

在前些年，大家都是用灭火的血清，才用热灭火
6 H+ ^+ L4 _4 m; Z+ d7 a9 W7 m热灭活:在56℃水浴30min
* X  P! ~; q5 I但是最近很多实验室都不再灭火，我们这就用人不用灭火，细胞照样长得嗖嗖的，甚至比灭火的长得好，这个就得看各自实验室的老板怎么想了

ldy689689

在前些年，大家都是用灭火的血清，才用热灭火0 N( q, M4 Q: J
热灭活:在56℃水浴30min
2 D, r2 Q# `* `8 n/ T# y但是最近很多实验室都不再灭火，我们这就用人不用灭火，细胞照样长得嗖嗖的，甚至比灭火的长得好，这个就得看各自实验室的老板怎么想了

ldy689689

热灭活:在56℃水浴30min

zly微笑

小牛血清是要灭活，胎牛血清好像不需要灭活吧。胎牛尚未出生，并没有补体成分。

zhanglixin522

加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养ES细胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。 1 E: P5 A# ]7 K) {  h$ H8 g! W
实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我建议您，若非必须，您可以不需要做热处理这一步。如此一来，不但节省您宝贵的时间，更确保血清的质量!

zhanglixin522

热灭活在56℃水浴30min)9 y' x) J2 y2 r- w' @
–热灭活一些可以产生免疫应答反应的物质（补体等）
: f8 c1 r* X+ _! Y–在昆虫细胞培养和胚胎干细胞培养中需要

zxiaoxiao311

热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质，在对补体灭活以外，还可去除血清中的支原体的污染。常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间，而时间则从15分钟到60分钟不等，其中最常用的就是56℃热处理30分钟。现在好像不主张热灭活，热灭活经常给血清产品带来负面影响，对血清的加热经常导致血清中沉淀的产生，此外，有研究结果证实热灭活步骤减弱了胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用。4 t' B8 J; M9 w! w
处理步骤① 选用与血清瓶同规格的对照瓶一个。②对照瓶内放入与血清等体积的水。③ 温度预试④ 血清灭活：血清瓶与带温度计的对照瓶一齐放入水浴箱中，待温度计所示温度上升至56℃时， 定时30分钟。 ⑥ 大瓶血清灭活后，进行分装，在-20到-70℃保存。