nestin tuj1 map2抗体问题

白巧克力

要做神经元分化，分别用nestin、tuj1、map2染色，确定分化状态。0 ~- q1 ?  Z& N) I$ h. a
问下：
8 m2 D+ Q9 T$ g; T/ n& e5 @" Z' P1）这2中抗体可以鉴定完全ips分化为神经元吗？还需要别的特异性鉴定吗？4 r# L0 h+ O$ q. Q3 Y
2）大家都用的是哪家公司的抗体？我本打算用abcam的，但是看到原文献nestin用的是R&D公司的，tuj1用的是Convance公司的，没怎么听说过的...7 m7 z/ U* y3 b
大家有什么建议啊，尽管提，谢谢！

susannajoke

nestin是干细胞标记物，没记错的话；Tuj1即beta III-tubulin，和map2（微管相关蛋白）都是神经元标记物。6 l* x9 N1 e/ S! B: E$ e
至于公司选择，我觉得问题不大，可以不拘泥于文献，ABcam，santa，millipore都还可以吧

Yedan

先说抗体问题吧（关于抗体我比较激动）9 N; N1 n6 i  z- P4 f- M
COVANCE的Tuj1抗体非常好用的，无论是IF还是IHC都很好染，至于价格有点小贵，我没记错的话1支要5000多（150还是200ul，我忘记了）。至于使用哪个公司的抗体，我个人的经验是Sigma肯定最好；Santa的抗体种类很多很多，好用的也很多很多，当然不好用的也很多很多（）；其他公司诸如R&D，Abcam(P.S.一句Abcam的抗体有优点贵，主要是体积太少了），CST的也还好，Millipore的抗体用的不多。
, r% d9 O, ~( S: v+ |/ o至于分化问题：5 x' P  {. v! E4 {; k  ^
Tuj1 是early marker ，nestin和map2才是成熟neuron的，我应该没记错。实验上，只做染色可能不够，得做电生理（别问我，我不会……）

白巧克力

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谢谢您的答复！您是抗体达人啊 哈哈！
* s  h$ \+ Z1 e但是分化的marker您确实是记错了...呵呵

susannajoke

nestin是一种中间丝类型的蛋白，能够特异性的表达在神经上皮干细胞上一种分子标记物；可能对神经元的分化有作用。NESTIN仅在胚胎发育早期的神经上皮表达，出生后表达就停止。为神经干细胞的特征性标志物。我看文献报道其为神经元干细胞或前体细胞标记物

白巧克力

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谢谢您的解释！您能再解释下TUJ1和MAP2吗?THX