nestin tuj1 map2抗体问题

白巧克力

要做神经元分化，分别用nestin、tuj1、map2染色，确定分化状态。
2 q8 a1 `1 H) s5 d3 S" l; y7 g问下：. v9 E3 a+ i( m* i
1）这2中抗体可以鉴定完全ips分化为神经元吗？还需要别的特异性鉴定吗？& n9 G2 b7 Z: `) p, T3 M4 V
2）大家都用的是哪家公司的抗体？我本打算用abcam的，但是看到原文献nestin用的是R&D公司的，tuj1用的是Convance公司的，没怎么听说过的...
8 l( Q& R* V6 t$ q! X7 c大家有什么建议啊，尽管提，谢谢！

susannajoke

nestin是干细胞标记物，没记错的话；Tuj1即beta III-tubulin，和map2（微管相关蛋白）都是神经元标记物。% f! f" l- M) r1 _/ E" t! A$ I/ Y8 `
至于公司选择，我觉得问题不大，可以不拘泥于文献，ABcam，santa，millipore都还可以吧

Yedan

先说抗体问题吧（关于抗体我比较激动）* h5 f" g% R4 D! m; P+ B
COVANCE的Tuj1抗体非常好用的，无论是IF还是IHC都很好染，至于价格有点小贵，我没记错的话1支要5000多（150还是200ul，我忘记了）。至于使用哪个公司的抗体，我个人的经验是Sigma肯定最好；Santa的抗体种类很多很多，好用的也很多很多，当然不好用的也很多很多（）；其他公司诸如R&D，Abcam(P.S.一句Abcam的抗体有优点贵，主要是体积太少了），CST的也还好，Millipore的抗体用的不多。
4 u/ H% H5 l8 S& N2 W0 J至于分化问题：# K0 C+ _3 Q6 A" }' \, y. s
Tuj1 是early marker ，nestin和map2才是成熟neuron的，我应该没记错。实验上，只做染色可能不够，得做电生理（别问我，我不会……）

白巧克力

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. P9 p" r! O$ f. C. w+ F0 l) J谢谢您的答复！您是抗体达人啊 哈哈！' o+ a& H% y+ A( ?+ [  Z
但是分化的marker您确实是记错了...呵呵

susannajoke

nestin是一种中间丝类型的蛋白，能够特异性的表达在神经上皮干细胞上一种分子标记物；可能对神经元的分化有作用。NESTIN仅在胚胎发育早期的神经上皮表达，出生后表达就停止。为神经干细胞的特征性标志物。我看文献报道其为神经元干细胞或前体细胞标记物

白巧克力

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谢谢您的解释！您能再解释下TUJ1和MAP2吗?THX