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楼主

发表于 2011-12-17 13:20 |显示全部帖子

不是引物的问题，你的模板GC rich，建议用LA Taq+GC buffer 2

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沙发

发表于 2011-12-17 13:29 |显示全部帖子

试着设计了一下，产物GC含量高达72%，估计你的引物可以用，用GC rich的条件吧

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藤椅

发表于 2011-12-17 14:57 |显示全部帖子

模板GC含量高，比如你的基因GC含量高达70%，这很不常见，在95度变性时，双链不会打开，需要特殊条件，比如TAKARA的LA Taq+GC buffer 2。

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板凳

发表于 2011-12-17 16:52 |显示全部帖子

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普通条件下的产物就不会有了，LA PCR会提高特异性

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报纸

发表于 2011-12-17 16:55 |显示全部帖子

我想看看你的引物怎么样

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