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[请教] 有谁用matrigel养过小鼠ES嘛?? [复制链接]

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包包
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优秀会员

楼主
发表于 2011-12-21 13:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题,准备做一点工作,还多谢指导。比如稀释比例是怎样的,需不需要特殊培养基??或者小鼠ES有什么其他FEEDER-FREE的培养体系?
% b, m" ^; M6 x0 N
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沙发
发表于 2011-12-26 16:46 |只看该作者
我用过BD的。步骤为:Matrigel™ Matrix Growth Factor Reduced (GFR) matrigel 4℃过夜融化后,用预冷tip(4℃)加入一定体积D/F12,以150μL/ cm2的浓度包被培养皿,37℃放置1h。制备好的Matrigel流动凝胶形成三维结构,细胞直接接种其上就可以了。
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藤椅
发表于 2011-12-26 16:47 |只看该作者
我这种是thick-gel的铺法,是用来使细胞分化的,还有一种是thin-gel,促进细胞增殖的,具体用法说明书上都有的。
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板凳
发表于 2011-12-26 16:48 |只看该作者
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我这种是thick-gel的铺法,是用来使细胞分化的,还有一种是thin-gel,促进细胞增殖的,具体用法说明书上都有的。

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报纸
发表于 2011-12-27 22:11 |只看该作者
也可以用ESGRO无血清无饲养层的培养基
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地板
发表于 2012-2-4 01:46 |只看该作者
回复 coralqin 的帖子& a4 O! r1 ?+ K

4 l9 Q2 M- G2 ]1 Y5 b: o, F" ^你好,我的实验也要用到这个BD的matrigel,我是按照wi-cell的protocol做实验,他是按照浓度计算的,我想知道matrigel的浓度是说明书首页的那个protein concentration吗,8 H- Z" \; g$ n) U, X/ M# {- K
另外我还想了解下,我只是想让我的IPS克隆在MATRIGEL上增殖,你是不是就是说我如果不按照浓度铺板,就应该用THIN-GEL呢,第一次做这个实验,心理没谱,所以想确认下,谢谢
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发表于 2012-12-16 23:54 |只看该作者
sarah19860420 发表于 2012-2-4 01:46 + }' ^8 k( l, Y$ `
回复 coralqin 的帖子+ E& q( O- @8 Y2 P
/ ^/ K& O3 q$ n5 f  e3 ^* n
你好,我的实验也要用到这个BD的matrigel,我是按照wi-cell的protocol做实验,他是按 ...

, R* Q) Q, L! N: x0 a. `基质的稀释倍数由BD Biosciences根据每批号的蛋白质浓度计算。
, U, S" l6 z  g# S蛋白质浓度请参阅产品的指定分析认证,也可根据LOT货号在线查询获取。% u5 C* `: A: A7 g
http://regdocs.bd.com/regdocs/searchCOA.do
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