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ADMSC 成脂方向诱导液的配制问题? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-12-27 22:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
准备做想成脂方向诱导,文献中是加:地塞米松,胰岛素,IBMX,以及吲哚美辛。" \5 C- G! m+ B# d0 z
我想问一下,这几种东西的如何存储?分别用什么溶解?-20度保存?需要分装避免反复冻融吗?5 h( g! c6 ~7 c2 u+ |) k0 d
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沙发
发表于 2011-12-28 08:59 |只看该作者
额也正在做这个,来几个高手指点下吧

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藤椅
发表于 2011-12-28 09:26 |只看该作者
地米有脂溶性和水溶性两种,脂溶性的用DMSO溶解,水溶性的水即可,所以你在买之前要注意。IBMX和吲哚美辛均用DMSO溶解,胰岛素用0.02M的Hc溶解,其中地米、胰岛素、吲哚要配成1000X,-20度分装保存,且地米和胰岛注意避光;IBMX配制成100X,1000x难溶解完全。所以DMSO溶解的不需过滤。或者现在又针对DMSO的滤器,不放心的话可以尝试。l
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板凳
发表于 2011-12-28 09:54 |只看该作者
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回复 zerollx 的帖子
% {4 B" E) H0 k1 s3 d- a# N/ S/ ~- L& G4 o  y: a
DMSO 溶解的话,有毒性,对细胞有什么影响吗? 还有胰岛素用hcl的话,对培养液的ph值有很大影响?很多同学都是用乙醇溶解的,会对结果有影响的吗?
  g# a: i% @6 x2 }1 K7 s
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报纸
发表于 2011-12-28 11:00 |只看该作者
有现成的诱导液卖,自己配制的话很麻烦,而且浓度不一定准确,如果资金比较充裕的话,最好买现成的,比较可靠,试验成功率也高。
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地板
发表于 2011-12-28 12:03 |只看该作者
本帖最后由 zerollx 于 2011-12-28 12:08 编辑
- e8 x2 a- u0 g8 b6 [  q4 k! c
1 a; w6 k3 b# h8 ?回复 winqi 的帖子
  ^( ^/ R! h$ N+ K% H) i) `6 p
: p) {* K% Q3 [, L3 ?实践经验告诉你,无论是DMSO,还是HCL,加的量是非常少的,不会影响细胞的,也可以向楼下所说的,买成品,成品存在的问题是现在市场上流通的特异性的诱导液很少,比如说你做小鼠的,可能只有C57的诱导液,假如你做ICR的,你直接用的话也许也能做出来,但是可能会导致细胞的大量死亡,所以这也是一个弊端。
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发表于 2011-12-28 13:21 |只看该作者
回复 漂泊的风 的帖子
( S& a* f5 }$ R6 ^% R+ @
# ^1 P0 b2 r( [3 x- i) z现在哪个公司的成品比较好?stemcell的好像也有不过好像是500多美金100ml的,这承受不了的。不知道其他家哪一家比较好。

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发表于 2011-12-28 13:23 |只看该作者
回复 zerollx 的帖子
+ ]. f6 s, l$ g3 u7 f3 k& c$ v8 W. h5 R# q$ f
我做的是SD大鼠的,我们也发现自己配的诱导液对BMSC和ADSC,同一只老鼠来源的,诱导的结果都不一样,所以才考虑是不是诱导液的原因。
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发表于 2011-12-28 19:47 |只看该作者
你可以考虑下是否是剂量的问题
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发表于 2011-12-29 08:34 |只看该作者
试剂一般选择sigma的小包装,不是特别贵,我记得IBM搞活动,200+ RMB就可以买到~
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