ADMSC 成脂方向诱导液的配制问题？

winqi

准备做想成脂方向诱导，文献中是加：地塞米松，胰岛素，IBMX，以及吲哚美辛。
' h' M9 I4 h# z我想问一下，这几种东西的如何存储？分别用什么溶解？-20度保存？需要分装避免反复冻融吗？5 f- A- N# d/ c$ b$ F; f7 g( y

冰枫de梦

额也正在做这个，来几个高手指点下吧

zerollx

地米有脂溶性和水溶性两种，脂溶性的用DMSO溶解，水溶性的水即可，所以你在买之前要注意。IBMX和吲哚美辛均用DMSO溶解，胰岛素用0.02M的Hc溶解，其中地米、胰岛素、吲哚要配成1000X，-20度分装保存，且地米和胰岛注意避光；IBMX配制成100X，1000x难溶解完全。所以DMSO溶解的不需过滤。或者现在又针对DMSO的滤器，不放心的话可以尝试。l

winqi

回复 zerollx 的帖子# d5 B+ ^$ x7 X% B+ i8 p& ?
7 r( o/ O+ n) R/ a5 l3 K
DMSO 溶解的话，有毒性，对细胞有什么影响吗？ 还有胰岛素用hcl的话，对培养液的ph值有很大影响？很多同学都是用乙醇溶解的，会对结果有影响的吗？
) r! |7 A7 X" w

漂泊的风

有现成的诱导液卖，自己配制的话很麻烦，而且浓度不一定准确，如果资金比较充裕的话，最好买现成的，比较可靠，试验成功率也高。

zerollx

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" R# D' G2 f  d2 g) o) U实践经验告诉你，无论是DMSO，还是HCL，加的量是非常少的，不会影响细胞的，也可以向楼下所说的，买成品，成品存在的问题是现在市场上流通的特异性的诱导液很少，比如说你做小鼠的，可能只有C57的诱导液，假如你做ICR的，你直接用的话也许也能做出来，但是可能会导致细胞的大量死亡，所以这也是一个弊端。

winqi

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( K+ W4 K: T8 w现在哪个公司的成品比较好？stemcell的好像也有不过好像是500多美金100ml的，这承受不了的。不知道其他家哪一家比较好。

winqi

回复 zerollx 的帖子8 ]  n- G- N7 n2 s0 l9 k& H
1 C# q' K7 n- _  Z* X
我做的是SD大鼠的，我们也发现自己配的诱导液对BMSC和ADSC，同一只老鼠来源的，诱导的结果都不一样，所以才考虑是不是诱导液的原因。

zerollx

你可以考虑下是否是剂量的问题

tjutiger

试剂一般选择sigma的小包装，不是特别贵，我记得IBM搞活动，200+ RMB就可以买到~