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(汇总)常用试剂保存条件:   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-12-28 17:11 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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本帖最后由 细胞海洋 于 2011-12-29 00:20 编辑
4 e6 u& N- p3 w  ?" H. ]" s8 S  R- O7 j  @# V1 P# X( n3 j% Y8 V
期望大家把自己实验室使用过常用细胞培养试剂,包括名称,及配制方法、用量及保存条件分享交流一下。
# z: }. P2 G) I" m! l8 @. w% R我先来bFGF,MEM稀释,50ng/ml,4度避光保存。1 r: {+ v( F4 @5 f
           DMSO,分装小冻存管5ML一管,按需使用,与完全培养基配成10%,4度平衡30分钟。% D+ O) O  t! {: y/ j+ E
           异丙醇,室温,无配制,避光保存。$ d* T9 I( b# h! Z9 e% S
           青毒素,-20度保存,因为不用,具体量也不清楚。. Y; K* l+ v" d4 i
其它的希望大家来给补全,谢谢!      
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18楼
发表于 2012-2-10 16:13 |只看该作者
现在进口胎牛血清已经不需要灭活了,至于小牛血清和新生牛血清是否需要灭活还是需要咨询购买厂家。7 R2 Y% A4 Z$ e) e: O
但是楼上说的4℃溶解确实很重要,我们实验室已经反复验证了很多次,室温溶解的会产生蛋白沉淀的。500ml的溶解后分装包装一定很重要,避免污染和反复冻融影响效果。
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17楼
发表于 2012-2-10 15:12 |只看该作者
各种细胞因子应先配成使用浓度的500或1000倍,用DMEM或者PBS配制,配制过程要防止污染,因子一般都很少不用过滤,然后按50或100ul分装,-20度冻存,使用前室温化开,用完后马上冻于-20。- S6 ~) _' w4 h0 Z, Q. t3 r
谷氨酰胺一般按100倍配制,PBS或生理盐水配制,过0.22um滤膜,1.5mlEP管分装后-20冻存,使用前化开并混匀(低温时谷氨酰胺会重新变成粉末沉于管底),用完后马上冻存。
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16楼
发表于 2012-1-9 14:36 |只看该作者
本帖最后由 dongxin 于 2012-1-9 14:39 编辑
9 f6 v1 c: j! p# |) s5 Z0 x1 s
) s+ }! t& f+ k3 c! W补充两条8 r( E0 F" E0 ^% s! q( I# j, ]
0.1%Gelatin: 0.5克Gelatin溶于500mLPBS,121度灭菌30分钟,4度保存备用。5 B0 C' p6 L1 f$ l+ C0 z
Ⅳ胶原酶(5mg/mL):100mgⅣ胶原酶溶于20mL DMEM/F12,0.22微米过滤,分装存于-20度备用。
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15楼
发表于 2012-1-4 09:03 |只看该作者
回复 meridian 的帖子8 E0 a2 _7 J' U* X! r( b3 W
- y8 n+ x7 Y0 I! c. d
恩,是否需要其实问问厂家就行了……

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14楼
发表于 2011-12-30 11:40 |只看该作者
回复 南宫燚岚 的帖子
$ n5 t7 S( k; Q9 S
1 V6 e# Q2 f7 {# a0 O是的。

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13楼
发表于 2011-12-30 10:21 |只看该作者
回复 南宫燚岚 的帖子( G* N0 \- N- Y- A
5 e1 A& b. z/ @+ z6 W, a2 X  U1 j  J6 D# B
对,是这样的。具体有什么样的讲究我也不清楚

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12楼
发表于 2011-12-30 10:02 |只看该作者
我们实验室谷氨酰胺统一配好后,根据配置培养液的用量进行分装。一般每支8ml,做好标记,放入-20度冰箱保存。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,4度放置一周可降解50%。注意!
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11楼
发表于 2011-12-30 09:23 |只看该作者
回复 南宫燚岚 的帖子8 r1 |8 \$ m& j$ ^6 [/ \
. {. ~6 K4 u( Y+ o' F( w  C6 i
也不见得,不是分细胞,而是购买的血清已经处理方式,一般是4℃溶解,57℃30 min灭菌,但是像我们使用的HyClone的南美胎牛血清就无需灭菌,只需4度溶解(很重要,不然室温溶解产生大量蛋白沉淀)
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10楼
发表于 2011-12-30 09:15 |只看该作者
回复 冰枫de梦 的帖子5 d  d' b6 x, R  c" n
# u0 r  h% I' g! u+ \
不一定都要灭活吧,得分细胞类型,按需灭活
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