【求助】有人熟悉TALEN技术吗？想请教下

chutu

一对TALEN导入细胞表达后，在特定序列处切断DNA链，产生双链断裂（DSB），这会激活细胞内的DNA修复系统，主要是在非同源末端连接（NHEJ）机制参与下进行断裂端的重新连接。但是NHEJ是一种极易引入错误的修复过程，会在连接处缺失或插入寡核苷酸，从而可能破坏基因的正常序列，引起靶基因的突变。所以可以利用TALEN技术进行很高效的定点基因突变，可以从中筛选出靶基因Knockout的细胞克隆。另外，DNA双链断裂也会增强同源重组修复过程。利用这一特性，与TALEN同时导入靶基因同源片段，可以增加同源重组的效率，也就可以提高Knockin的成功几率。