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bnm789 发表于 2012-1-11 20:59 2 |! U4 M* M( j3 D2 L' G" y/ s
回复 zarecol 的帖子6 V7 u' \2 D' W( z) v
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不是成纤维细胞吗?用bFGF 0.5ng/ml怎么样 2 |0 }% S: U* V* ^4 f' I+ e a' @
大鼠的 没这么麻烦的
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取;四周龄一只 双侧股胫骨 无血清培养基或PBS反复冲洗. C3 w" ?; v" L' |
莫起泡 % y7 U( E: l+ |' e9 N% H
过滤一下 离或不离心 DF12+10%GibcoFBS 双抗 L-谷- G2 V; J( W) K+ r$ f
培养
0 f( @+ A) I6 G& p% J/ X# @; B次日全量PBS洗数次全量换液,此后隔两日一换
' |' S2 M% W# d! i7 I80%以上时传代,首次1:2,再传可1:3
* p- w1 E0 Y6 C1 ^6 D0.25胰酶首次3-4分钟,此后1-2分钟,37度2 f6 G$ z1 W3 w0 ?1 Y( A
不加EDTA,故亦不必离心3 K0 |8 O- W- u: L. F% n: M9 M
难以消化者为上帝不喜者# }$ X/ f5 F, e: {3 g
弃
3 ^$ M! L) g+ j/ s8 ?) a勿疑。此法可使之传十代,十代之后,年老色衰,已无当年风华 |
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