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关于过滤的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-1-11 11:26 |只看该作者 |正序浏览 |打印
大家好:
8 w  ~0 m& e! D我在一个公司里买了没有添加bFGF的培养基,现在需要添加这个因子,但是不知道用什么溶解?还有溶解完后是否需要过滤?我买的是GIBCO的,但是不知道母液浓度配多大?我买的一共才10ug,配完体积比较少,不知道需不需要过滤?但是我以前的MMC就没有过滤,好像也没事!还有IV型胶原酶配完是否需要过滤除菌?
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发表于 2012-1-12 12:31 |只看该作者
你如果是配ES培养液的话,工作浓度是8-10ng/ml,你可以用含0.1%BSA的PBS溶解,如果配置8ng/ml的工作液10ug加1.25ml溶解,分装冻存,如果是10ng/ml工作液加1ml溶解,配培养液的话,1ml培养液加1ul ,GBICOD的培养液不用过滤,胶IV需要过滤,那东西不贵,不拍损失的。
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发表于 2012-1-12 11:16 |只看该作者
回复 kgx1986 的帖子
; J2 F( ]' ]0 @+ d, T
' i: c! H, G, w3 v% D非常感谢,你回答的非常彻底,谢谢啊

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发表于 2012-1-12 10:55 |只看该作者
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我一直有用细胞因子,一直没有过滤(咨询过该因子公司技术总监的),溶解是用0.1%的牛血清白蛋白的PBS液,然后分装,具体分装的量,根据你一周的细胞培养用液量决定,因为细胞因子在液体内容易降解,时间太长就失去效用,最好不要超过一周,分装后的细胞因子存储在-20℃冰箱内,使用时取一管室温几秒钟就溶解了(量少O(∩_∩)O~就几μl),加入培养液时,用培养液加入因子储存管,混匀,吸出,洗3次,尽量让因子物尽其用~~~其余的就是带有因子的培养液使用保存,你应该很清楚了,,祝你好运!6 O' |% e% o5 i& k5 r. v
-------------------------------你买的那个公司的产品,最好电话咨询一下一下该公司技术,确保万无一失。
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发表于 2012-1-12 09:40 |只看该作者
是无菌的,不用过滤1 S2 K8 J* q5 b* M0 o* W
这些东西,都可以直接打电话问GIBCO的,这样更加保险一点。毕竟,买了他的东西,这点技术上的咨询还是要给的
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发表于 2012-1-11 17:47 |只看该作者
回复 song58 的帖子
$ ]0 F3 @& G5 E, ], B1 s: P5 H; @4 f7 X% E. q# S
没有写无菌的,期待你整理后的答复,谢谢啊,不胜感激

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发表于 2012-1-11 17:15 |只看该作者
回复 rongrong 的帖子, J. O7 F. {0 [- T2 u6 V

4 ]; Z6 G7 y% V' f4 h2 C, U瓶子上有写无菌吧?有一阵没弄了,回头整理整理,一起切磋一下

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发表于 2012-1-11 17:13 |只看该作者
回复 冰枫de梦 的帖子
; \" R4 S* L% @
( q) p4 C% ^% h, N胶原酶肯定得滤啊,那东西是在外面称的,肯定得再滤一回。嘿嘿
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发表于 2012-1-11 14:57 |只看该作者
安全起见,胶原酶配好后最好用0.22纳米微孔滤膜过滤下
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发表于 2012-1-11 14:40 |只看该作者
回复 zhusealin 的帖子
2 j; f/ Q; n0 t% L* c* f) o$ G
4 _! y' _7 I5 a$ S9 w, e主要是我就想配好母液,母液直接加入到现在买到的-bFGF不完全培养基,不知道大家的hiPS的完全培养基的流程是什么?是否可以拿来分享下??
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