大鼠MSC聚团，怎么回事，急急急！！！！

bnm789

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大鼠MSC原来长的很均匀，后来发现聚团，怎么回事，急急急！！！！全骨髓培养，P1  0.25%胰酶+0。04%EDTA消化，原来也出现过，这样传代后细胞状态更差，求原因，请各位高手指教

冰枫de梦

你酶解消化时间为多久，时间长了有可能是这个样子。MSC在37摄氏度下酶解3分钟应该可以了

luoziwei

什么血清？

都市青蛙

消化的时间过长，吹打不均匀，种的时候成团，都会出现这种状况的

eggnihao

从你的图看，细胞传代后细胞接种密度不够，成团一般都是因为吹打不均，未成单个细胞。

bnm789

回复 luoziwei 的帖子  W, [% V5 T5 b4 r

, u) M3 {% z! b" q- W: aGIBICO FBS

bnm789

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- u" L3 Z% W# i: `- r6 p# s) `用手拍瓶子 基本上都掉下来时立即用血清中和   一般2-3分钟

liluli0715

感觉你的细胞不是聚团，如果是聚团细胞应该张的很密呈涡旋生长的趋势，但从你的图片上看，细胞扁平而且连成一片。其原因可能有两点，一是培养基，我们实验室之前用α-MEM(GIBICO)细胞生长状态很好，后换成DMEM-LG(HYCOLN)细胞生长状态就不怎么好；而是接种密度低了，细胞也会呈扁平状；

gact

这个状态不好，，明显是营养状态不好。。。换换血清之类的试试。。

weijunts

上图是细胞接种过于稀，解决的办法可以接种3天左右再次传代，尽量减少酶消化时间，另接种后3天内消化传代会明显损伤细胞。