急！急！急！急！CIK细胞实验中出现的问题？？？？

DannyXia

可能是单核细胞。CIK是悬浮的。

lyj-0017

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* X* Z" o; f$ s5 `IL-2降解？这怎么检查IL-2是否降解呢？我们把IL-2加入培养基后一般三四天就会全部加完，平时放在4度冰箱保存，IL-2在这段时间难道会降解吗？
9 n) d2 F: b& ~! n1 Q: i另外一个，会不会是细胞在增殖较多，而在此之前并没有添加够足量的培养基而导致细胞死掉呢？（也就是你说的细胞密度过高）

meister

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, j$ s' q) c' W* a* f! ]- A因子降解不容易检测。 所以因子要分装， 避免反复冻融。 会不会是细胞密度太高，营养不够就不好说了， 得自己观察。

woosheng

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说的有道理。仔细观察贴壁细胞，会发现有两种细胞。一种胞体纤细突起多，另一种胞体大突起少。这两种应该都来自单核细胞，会防碍淋巴细胞增殖。

lyj-0017

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/ _. a4 N1 C1 _" E" G4 Q/ e$ R$ k8 V: |2 `' V: _" r
嗯，也没别的办法，只能平时多观察多比较了，非常感谢

jingjing6837

我养CIK也出现过这种问题，多数是因为单核细胞贴壁的原因，一开始应该先贴壁1.5小时去除单核细胞，然后收集淋巴细胞，在培养的时候如果贴壁细胞很多，要更换培养瓶弃掉贴壁细胞调整细胞密度，这样CIK不会受到影响，可以扩增起来

kangyi08321

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$ Y8 j, s5 [. B% P/ D/ ~9 l1 x* H) n" h2 F2 A3 K
如果你用的是自体血浆啊，如果是自体血浆没有灭活去除血浆中的纤维蛋白原的话，在培养过程中，会出现纤维蛋白原凝结（原理同血液凝固），细胞会被纠缠起来死掉。用自体血浆的话还是先灭活下吧。同胎牛血清灭活补体一样。只是我不知道会不会灭活掉血浆中的一些有效成分，有没有大神在这方面有研究，请指教！

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! r1 _( Y2 `2 i2 \% l2 z: V2 L) y$ [0 t( L7 J3 ]4 M1 D
你好，最近养CIK细胞，细胞总是贴壁，悬浮细胞也少，加入CD3和IL-2好像没起到作用，
- ^( A' f+ U8 r一直贴壁，吹不下来，没有克隆团产生。CIK细胞一直不会扩增，养着养着就会凋亡，，这会是什么原因？( y8 z4 Z# c5 N& F6 U5 Q

) @1 J. W5 Z$ A4 W  `; Y9 Q我的问题跟你去年碰到的情况一样，不知道你解决了吗，能告诉我问题出在哪吗？