急！急！急！急！CIK细胞实验中出现的问题？？？？

hwlightning

最近养CIK细胞，细胞总是贴壁，悬浮细胞也少，加入CD3和IL-2好像没起到作用，, H. z) _8 v% |
一直贴壁，吹不下来。, W0 E' e, ^; z* y
CIK细胞不是悬浮的吗？为什么会还含有那么多贴壁细胞，如果贴壁细胞多，悬浮细胞就少，成团就会更少，和面再补加一支CD3也不起作用。
: e. u: ^+ A% P还有一种情况是细胞一直不会扩增，养着养着就会凋亡，细胞团也会凋亡，这会是什么原因？

ly200101042

我也遇见过这种情况 而且有时候细胞贴壁还变型了
5 f; Q8 I) \; ^9 \: q1 }& o" x是不是细胞太多太挤了啊 有时候我要是分的细胞多 就会出现这种情况啊

hwlightning

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+ E( b, ]/ r* h0 M: y, D$ T" K% G2 e: r* P
CIK细胞应该是不贴壁的，也不会因为细胞多而变型，你分离的时候是不是红细胞很多，" ]$ `) S7 b3 h
想过怎么去除红细胞没？

ly200101042

我用过溶血素 但有时候嫌麻烦啊

woosheng

/ Z+ X2 L$ O/ X# n( J6 Q, r
  O# D9 _' t$ p: c  Y  z0 \5 Q4 x. j可能是单核细胞。PBMC里有除了淋巴细胞以外还包含有单核细胞。单核细胞容易贴壁，分化成DC和巨噬细胞。
2 N/ R$ t( A* x& Y. e1 r加CD3抗体和IL-2是没有用的。

lyj-0017

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% b+ @2 l5 K$ [, R
' N) d. `8 H. \8 n& Q/ v你好，我们现在培养CIK液出现你说的这种情况。培养几天后，培养基颜色根本不怎么发生变化，培养液中也有絮状物，像是细胞成团，最后收集的数量非常少。你们现在这个问题找到原因了吗？是如何改善的呢？

ljl1988115

单核细胞比较多吧

meister

回复 lyj-0017 的帖子" s, ~2 ~: o' e8 O5 @
; H8 N+ E0 V0 K, C5 f2 V# l+ }
细胞不长，出现许多絮状，是细胞死了！

lyj-0017

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: a7 h9 l" N- O4 z; V
* J# z- ^* Q- h, n( E那么，细胞为什么会自己死掉了呢？是细胞因子没起作用？还是因为营养不足呢？或者别的什么原因？

meister

回复 lyj-0017 的帖子. q0 M1 G. h0 y# W8 S( \

7 {# X. q$ s6 c# S' l细胞会死掉，主要是两个原因， 一是培养基问题。 二是细胞密度过高。
0 t- K. f, R5 f, i+ r5 w我估计你的是培养基有问题。看看IL-2是不是降解了。