请教华通氏胶的剥离

huajie881026

quge_00 发表于 2012-8-11 21:07 # g, n# ~8 W7 s2 u) ^4 H5 r9 }! ^
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" T6 q+ ]( |) z+ E1 C你的脐带状态不是太好吧，剥颜色是瓷白色的吗?离时容易破碎吗?如果是有半透明 ...

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请教，多少组织块能爬出细胞？我没剥，但是爬出细胞的组织块较少，大概十个有两个左右能爬出来。

quge_00

回复 上帝帮我转运吧 的帖子: ~# l/ s; m$ L0 o! J( K, U- ]5 A

6 K7 _0 e9 {1 ]# ]你的脐带状态不是太好吧，剥颜色是瓷白色的吗?离时容易破碎吗?如果是有半透明的感觉就有水肿，不太好养出细胞了。
: ]6 u+ N# I+ g脐带应该是柔韧的组织，不管怎样，原代组织细胞培养，无菌操作永远是第一位的（分离脐带胶全程器械操作，手套也是非常脏的。。。）。组织块要贴壁良好细胞才容易爬出来。
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, K" H7 h+ b0 d5 S& I- f' h0 @' D5 G. ^4 J. K

bibottll

为什么我用酶消化之后得到的细胞数量很少呢？

leungyk

单个核细胞 发表于 2012-2-17 10:16
/ o6 n3 B% C/ A$ L( U回复 leungyk 的帖子  B& y8 q( g! L- M7 _0 G
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从采集、运输到处理前置于4℃～12℃，不要超过48h，建议36h内，以便留下足够的时间进 ...

* e0 w" j9 r+ T謝謝！' X+ r5 h( {* N9 E
其實我做過個小小實驗，存放在PBS+雙抗中，室溫下12h也可以，但當然效果不是太理想！; r* p" q2 O( v) _

上帝帮我转运吧

非常感谢大家的帮忙！

ljj0558

我剥过两次，仅做参考：4 g4 m# S! c% {4 i+ g/ o, X; ]3 k7 b4 K+ p9 I$ n
1.把脐带剪成小段，便于剥胶；: ]9 W3 i6 N; q3 |1 P. n: f$ L
4 u# b! _2 Q$ s: o; F2.纵向稍剪开外表皮，再用带齿镊子沿剪的方向把外表皮撕开，再进行两动脉和一静脉的剥离，该过程基本全是用镊子操作；! v" B) J3 h* L7 T
6 Y6 K9 Q* L% A2 p0 B1 S& c3.血管分离了后再剥胶，除去血管外，表皮内的基本都是可以用来分离间充质干细胞的胶；, n# {* Y, R( \0 G. p3 ~( m7 i1 l- @! l
我们剥的胶是可以撕成条的，而且质地胶白，没有你说的粘粘的，估计是采样太久或没有保存好（具体的采样和保存我也不知道）3 D: n" G# p6 `) k4 t  p2 E, P+ d  Y; v
只要把表皮撕开就好，不用剥离外表皮，直接把脐带摊开，再撕胶；6 s+ Q% M" D( |* |5 J  ~- l2 ?
2 w% K/ S1 ~. N* d5 L  n8 @剥胶很费手劲，而且用力要恰当，撕胶的时候不要把表皮也带了；
9 n. W! o% `2 v: ^; \  ^# o3 k6 }# E( C  n3 f4 F/ [) ]动脉比较好剥，静脉粗薄不好剥离，多操作几次就熟了
+ r# w, @& x6 n4 H. f) y0 I0 N9 U; b& w, O- O% z- Q
尽量剪成小段就ok了

单个核细胞

回复 leungyk 的帖子1 Q' |3 ~6 A) ]; V' X1 R' D: \
, ?5 {  @" W" }; y7 _) D; X# I
从采集、运输到处理前置于4℃～12℃，不要超过48h，建议36h内，以便留下足够的时间进行处理。

qiqishichaoren

回复 leungyk 的帖子7 v; N  ~9 F. H) V* @! x5 {
, W+ U+ L  ]$ J5 Q8 O) `
放4度啊，要不然你放室温不是也有助于细菌滋生吗！有缓冲液就行了，最好用培养基缓冲没过脐带组织就可以了，里面加双抗。

lazyworm

回复 细胞海洋 的帖子
. C" A5 c4 x& l9 y8 s" {, b0 d/ Q0 n! \7 U/ R! I- C
经常，可能是浏览量大的缘故吧，说明我们的队伍越来越强大了哈。

细胞海洋

回复 lazyworm 的帖子' d; }: u2 Z% \3 L2 I  h

( K- f8 _+ K7 c2 W+ R& `4 M经常还是偶尔 最近浏览量大 的确服务器有时会卡 还望见谅