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[请教] 全反式维甲酸配制及保存遇到的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-2-7 17:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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我是做细胞培养的,要用全反式维甲酸(ATRA)做诱导剂,在实际操作过程中遇到了一些问题要向大家请教,
$ d, }9 Q( Q" G1,我买的ATRA是sigma公司的,50mg/支装,用无水乙醇溶解,请问溶解后的ARTA在多少温度下避光保存?保存期多长?在无水乙醇中的全反式维甲酸是不是易变性分解(说明书上说要两周内用完,但这很难做到,实验周期较长)?' W7 ?$ Y  d2 x9 ~- j
2,也有用DMSO溶解的,这种方法可以保存多久?
! M4 L1 `0 T+ ]4 a2 K, _% q6 P8 }3,能不能每次取出一部分来溶解配制,这样可以多次配制,但ATRA对光和空气很敏感,每次取出称量配制可能会使其再光和空气中变性,所以不知这种多次溶解是否可行?
# a; F  c. z. k8 m$ @7 n5 `$ a
; |) X8 C; x0 N' r请各位战友们给予解疑答惑,谢谢。

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沙发
发表于 2012-2-7 21:43 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。
" I7 H% I4 w2 o' N1 C! j具体可以这样:
( m, J  z  _# Y/ e. i1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)
  U4 ]7 C+ V; ]0 X& a2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即
7 s2 V. x) `& k. U为临时储存液(浓度50微克/ml)" m( ?6 e! z% z: y8 M
3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)4 B- y0 r: D1 M7 P+ t
起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释
/ ^9 u" ^# H+ }7 j- v$ F  r: [) z! a2 q$ t6 I( J
至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触
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藤椅
发表于 2012-2-7 21:44 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。% Z& s7 O9 ^9 m4 W: k" m- M4 f( W
具体可以这样:* |; R% U7 V: w6 L
1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)# B0 e6 i2 o" w9 ?3 N' u, a% Z
2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即3 l# R: Q2 x/ Y: m, ^
为临时储存液(浓度50微克/ml)
/ y! t* {5 o6 C) G" p  v3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)/ U6 ]% N! k$ b2 g6 e
起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释
- F9 Z* ?4 z0 {( @8 P& I/ N3 J
, [& x0 |# \6 c" j0 V8 o! C) q3 ?$ [1 A至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触

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板凳
发表于 2012-2-8 00:38 |只看该作者
回复 微笑ci 的帖子
. m" i: u2 {. q0 N  |6 s/ m8 F* u; W" K; a2 h
暂时清除你的积分 解释一下 为什么你的问题和网上一个2008年的老问题一样,只是重新编辑了一下顺序?

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报纸
发表于 2012-2-19 10:14 |只看该作者
本帖最后由 微笑ci 于 2012-2-19 10:33 编辑   W7 {  w0 ]" F5 T& G* l$ T
! @4 t5 d8 V; f: f! s
回复 细胞海洋 的帖子) g, b- P3 A2 D: ]+ V" j% i
# t4 D$ q2 p. Z6 Q2 I
解释:您真的很细心,网上08年的这个问题我也搜到了,但并没有针对该问题的答复。我是因为要用全反式维甲酸来做神经诱导用,说明书我看了之后有一些问题不明白,才在网上搜了这个问题,网上的说法不一,我只是想找用过的人给我个确定的答复,而08年的这个问题也恰巧包括我要问的,所以就偷了个懒~  请问还有疑问吗?

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小小研究员

地板
发表于 2012-2-20 09:06 |只看该作者
回复 微笑ci 的帖子
0 G8 b4 n# d, w! I4 v# c% Q1 q9 r1 G& H2 I
已经撤销扣分 以后转帖别人的内容,一定注明作者和出处

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7楼
发表于 2012-2-20 20:15 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子5 a6 D; m; z/ H: v2 K4 Y

7 h0 Q3 s- _5 N  ~5 `+ _( _多谢版主!新手上路,不懂规则,请多包涵!

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8楼
发表于 2018-3-9 21:05 |只看该作者
刚好用到这个,学习一下。
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