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[请教] 全反式维甲酸配制及保存遇到的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-2-7 17:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我是做细胞培养的,要用全反式维甲酸(ATRA)做诱导剂,在实际操作过程中遇到了一些问题要向大家请教,( i3 q( ?$ I$ d9 _% M/ K; n
1,我买的ATRA是sigma公司的,50mg/支装,用无水乙醇溶解,请问溶解后的ARTA在多少温度下避光保存?保存期多长?在无水乙醇中的全反式维甲酸是不是易变性分解(说明书上说要两周内用完,但这很难做到,实验周期较长)?
1 j3 s( h6 T5 U2,也有用DMSO溶解的,这种方法可以保存多久?
" k* k  z  {) ~  Y3,能不能每次取出一部分来溶解配制,这样可以多次配制,但ATRA对光和空气很敏感,每次取出称量配制可能会使其再光和空气中变性,所以不知这种多次溶解是否可行?
  {3 o% V$ `4 T7 c/ x4 L8 I/ T- z8 G) C0 W
请各位战友们给予解疑答惑,谢谢。

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沙发
发表于 2012-2-7 21:43 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。
, ?& b7 L: s" p/ H具体可以这样:
! u! W3 e! y+ ~& j9 n+ w: d1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)$ P4 p; f$ B6 n8 s4 V3 g( B9 D
2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即
0 x+ H& T  R, H8 A; {! I9 ^为临时储存液(浓度50微克/ml)" q6 X4 \0 R' i9 }
3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)* @$ c+ g7 A8 \( c
起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释
( R* G; f+ @7 |6 C. g* u+ }2 z) l9 L9 Q9 U5 k7 c
至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触
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藤椅
发表于 2012-2-7 21:44 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。
$ C! o6 Q* i+ g, l2 Q) h; H具体可以这样:
& r  A9 ^" h  A9 [+ f( S$ W( ~1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)
8 p( ]. M- G4 d8 }2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即
; z: s' l3 r( \0 e为临时储存液(浓度50微克/ml)
! v  g1 N: j* W) ]; W( {9 j) L3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)
) P+ w3 c3 I/ H! Y起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释
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# }5 ]) E8 _! q: x- p5 R( c至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触

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板凳
发表于 2012-2-8 00:38 |只看该作者
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回复 微笑ci 的帖子
( L# `+ r; ?# |: `: @- ^, }# M7 T- y' K: t; a
暂时清除你的积分 解释一下 为什么你的问题和网上一个2008年的老问题一样,只是重新编辑了一下顺序?

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报纸
发表于 2012-2-19 10:14 |只看该作者
本帖最后由 微笑ci 于 2012-2-19 10:33 编辑 $ W& v0 [9 l8 j& L

5 ~% q; l2 x" Y* m0 S- y& B- {回复 细胞海洋 的帖子7 g3 V/ M; p$ @% S$ H; f

% E" `  C/ u- \6 y; }/ v解释:您真的很细心,网上08年的这个问题我也搜到了,但并没有针对该问题的答复。我是因为要用全反式维甲酸来做神经诱导用,说明书我看了之后有一些问题不明白,才在网上搜了这个问题,网上的说法不一,我只是想找用过的人给我个确定的答复,而08年的这个问题也恰巧包括我要问的,所以就偷了个懒~  请问还有疑问吗?

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小小研究员

地板
发表于 2012-2-20 09:06 |只看该作者
回复 微笑ci 的帖子
& a5 R3 a# ?3 N5 s8 W
2 B& I" Z- L3 a9 y  z- Y3 x1 M' m. }& S已经撤销扣分 以后转帖别人的内容,一定注明作者和出处

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发表于 2012-2-20 20:15 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子3 o& {7 L& f- B2 Y( c
$ J4 f. n4 g/ S5 z& Q; l4 x6 r
多谢版主!新手上路,不懂规则,请多包涵!

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发表于 2018-3-9 21:05 |只看该作者
刚好用到这个,学习一下。
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