干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 100270|回复: 7
go

[请教] 全反式维甲酸配制及保存遇到的问题 [复制链接]

Rank: 1

积分
17 
威望
17  
包包
195  
楼主
发表于 2012-2-7 17:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我是做细胞培养的,要用全反式维甲酸(ATRA)做诱导剂,在实际操作过程中遇到了一些问题要向大家请教,, ?) j$ G/ X$ F- }8 ?
1,我买的ATRA是sigma公司的,50mg/支装,用无水乙醇溶解,请问溶解后的ARTA在多少温度下避光保存?保存期多长?在无水乙醇中的全反式维甲酸是不是易变性分解(说明书上说要两周内用完,但这很难做到,实验周期较长)?
4 O4 P5 |9 n, U. ?! }8 {2,也有用DMSO溶解的,这种方法可以保存多久?8 |9 ]8 m' j% ?% T% L$ V
3,能不能每次取出一部分来溶解配制,这样可以多次配制,但ATRA对光和空气很敏感,每次取出称量配制可能会使其再光和空气中变性,所以不知这种多次溶解是否可行?1 c  Q/ W# U0 d

' M1 W+ \) f0 y& d" F" t请各位战友们给予解疑答惑,谢谢。

Rank: 2

积分
234 
威望
234  
包包
197  

优秀会员

沙发
发表于 2012-2-7 21:43 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。, a$ v3 b" ~' M
具体可以这样:
! j; N" [3 s- P2 m1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)4 _0 q) u& Z( d% d% Q
2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即
; Z- g3 ~+ y( ?+ u- C2 @为临时储存液(浓度50微克/ml)8 ~+ a! Y  P" s
3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)
7 x5 f( r  _6 u起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释0 ~9 Z. K6 P$ j& v' y

8 g' ]; g" q3 e2 L4 w; y- b至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 30 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 30   查看全部评分

Rank: 2

积分
234 
威望
234  
包包
197  

优秀会员

藤椅
发表于 2012-2-7 21:44 |只看该作者
你如果工作液为0.5微克/ml,那你就配成50微克/ml的储存液。
# e" k; N8 g- y7 s3 q6 k4 x* s具体可以这样:
# O! Z1 r" I8 }- P+ T8 A1、100MG RA先加入2ml DMSO(这样浓度就是50mg/ml)# t. r# X2 J% N
2、然后取出n微升(不要取太多,两星期内用完就行),稀释1000倍,这时即
+ K' R9 O+ B+ h0 i+ u- g" Q为临时储存液(浓度50微克/ml)
& _( T: t: e8 a) M& b5 H3、用的时候按100倍稀释加就行了(浓度0.5微克/ml)
5 c& |9 B+ `5 Y7 G* o3 p' G起初DMSO溶解的RA可以-80长期保存,下次用的之前再稀释9 `: K7 B. n6 f: e% C. G
& O- `0 M0 k# p
至于惰性气体,我认为如果有条件就尽量,没有条件就按上述方法一次性溶解,把原液分装好保存,就可以尽量避免与空气长时间接触

Rank: 8Rank: 8

积分
306 
威望
306  
包包
3648  

小小研究员

板凳
发表于 2012-2-8 00:38 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 微笑ci 的帖子3 Y% H* Q. h' N9 H+ ^) B

% S7 Z0 V; m' ~! t: C暂时清除你的积分 解释一下 为什么你的问题和网上一个2008年的老问题一样,只是重新编辑了一下顺序?

Rank: 1

积分
17 
威望
17  
包包
195  
报纸
发表于 2012-2-19 10:14 |只看该作者
本帖最后由 微笑ci 于 2012-2-19 10:33 编辑
! ~$ h8 m( R" n/ x- Y6 M) x% S# W. H4 W
回复 细胞海洋 的帖子' F) d7 O& S/ L: A$ i2 v

  T# q: N9 q$ T% ^解释:您真的很细心,网上08年的这个问题我也搜到了,但并没有针对该问题的答复。我是因为要用全反式维甲酸来做神经诱导用,说明书我看了之后有一些问题不明白,才在网上搜了这个问题,网上的说法不一,我只是想找用过的人给我个确定的答复,而08年的这个问题也恰巧包括我要问的,所以就偷了个懒~  请问还有疑问吗?

Rank: 8Rank: 8

积分
306 
威望
306  
包包
3648  

小小研究员

地板
发表于 2012-2-20 09:06 |只看该作者
回复 微笑ci 的帖子
2 i' n( q$ ?) v6 V5 q9 y. D5 X2 U: K; h+ Q
已经撤销扣分 以后转帖别人的内容,一定注明作者和出处

Rank: 1

积分
17 
威望
17  
包包
195  
7
发表于 2012-2-20 20:15 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子
. U: i+ d0 C) t8 y- _! W/ \  ~( R+ [% }
多谢版主!新手上路,不懂规则,请多包涵!

Rank: 1

积分
威望
0  
包包
7  
8
发表于 2018-3-9 21:05 |只看该作者
刚好用到这个,学习一下。
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-5-19 03:49

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.